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1.用PBS或適當(dāng)?shù)木彌_液制備10-50 µM PI溶液。
2.向細(xì)胞培養(yǎng)物中加入體積為細(xì)胞培養(yǎng)基1/10的PI溶液。
3.在37oC下孵育細(xì)胞10-20分鐘。
4.用PBS或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌細(xì)胞兩次。
5.使用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞，激發(fā)波長為535 nm，波長為617 nm
排放過濾器。
碘化丙啶 PI在多色熒光應(yīng)用：
碘化丙啶（PI）是細(xì)胞不可滲透的核酸嵌入染料。 由于PI被排除在活細(xì)胞之外，因此通常用于選擇性地對混合的活死細(xì)胞群體中的死細(xì)胞進(jìn)行染色。
PI用作紅色熒光核酸染料；
PI與核酸結(jié)合后熒光增加20到30倍；
PI在所有類型的細(xì)胞中都具有死細(xì)胞特異性，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞，細(xì)菌和酵母；
PI與流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡兼容。
進(jìn)入細(xì)胞并與DNA和RNA結(jié)合后，PI的熒光增強(qiáng)20到30倍。 PI可用于流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡檢查。 PI還用作多色熒光成像的復(fù)染色，但是核特異性染色需要消化細(xì)胞RNA。
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