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看完本篇你就知道反轉(zhuǎn)錄試劑盒的特點(diǎn)有哪些了
反轉(zhuǎn)錄試劑盒是一種高效、穩(wěn)定、快速并可以去除基因組DNA污染的反轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。試劑盒采用分子進(jìn)化技術(shù)多點(diǎn)突變的新一代反轉(zhuǎn)錄酶LabScript M-MuLV RTase，大幅度提高了穩(wěn)定性和反轉(zhuǎn)錄效率。
本試劑盒為一管式反轉(zhuǎn)錄預(yù)混反應(yīng)液，5×RT MasterMix II中含有反轉(zhuǎn)錄第一鏈合所需的所有試劑。
通常Real-Time RT-PCR等實(shí)驗(yàn)需要先用DNase I消化去除RNA中殘留的基因組DNA(gDNA)，但是傳統(tǒng)DNase I處理復(fù)雜并容易造成RNA的降解和損失。
本試劑盒中使用了具有DNA分解活性的特殊4×gDNA Eraser Mix，2分鐘消除gDNA殘留，不需要DNase消化和后續(xù)繁瑣步驟。
下面讓我們一起來(lái)了解一下反轉(zhuǎn)錄試劑盒的特點(diǎn)吧：
1.制品為預(yù)先混好的Premix形式，只需加入模板RNA和水便可以開(kāi)始反應(yīng)。
2.可以在較短時(shí)間內(nèi)高效合成Real Time PCR用cDNA，是進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應(yīng)的理想試劑。
3.使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2種反轉(zhuǎn)錄引物，可以合成適合Real Time PCR用cDNA。
4.新一代反轉(zhuǎn)錄酶LabScript M-MuLV RTase大幅度提高了穩(wěn)定性和反轉(zhuǎn)錄效率。
5.采用gDNA Eraser僅需2分鐘清除DNA殘留，不需要DNase消化和后續(xù)繁瑣步驟。
6.全預(yù)混的反轉(zhuǎn)錄Mix，只需加入RNA和水，15分鐘簡(jiǎn)單快速完成反轉(zhuǎn)錄。
7.同時(shí)2種Mix在-20℃不易凍結(jié)，減少了化凍和混勻時(shí)間，使用更簡(jiǎn)單。
8.本產(chǎn)品針對(duì)qPCR進(jìn)行特別優(yōu)化oligo dT和N6隨機(jī)引物配比，使cDNA合成可從RNA轉(zhuǎn)錄本的各個(gè)區(qū)域起始并具有相同的反轉(zhuǎn)錄效率，大程度保證了qPCR結(jié)果的真實(shí)性和可重復(fù)性。
9. Real-time RT PCR定量需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的條件就是需要將總RNA和反轉(zhuǎn)錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時(shí)，由于模板濃度低不穩(wěn)定，因而會(huì)縮小曲線范圍，結(jié)果準(zhǔn)確度降低。本制品中附加了標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR)，將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時(shí)也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋?zhuān)菀自趯拸V范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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