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說說細菌回復(fù)突變試驗的數(shù)據(jù)處理與結(jié)果評價

來源:匯智和源生物技術(shù)(蘇州)有限公司   2022年03月09日 18:35  
  細菌回復(fù)突變試驗用于檢測DNA損傷引起的基因突變。通過檢測受試物質(zhì)對受試菌株某些特制突變體的突變能力,即使該菌株從組氨酸/色氨酸依賴型突變?yōu)樵B(yǎng)型,判斷受試物質(zhì)是否為誘變劑。測試應(yīng)在有和沒有S9代謝激活系統(tǒng)的情況下同時進行。在瓊脂培養(yǎng)基中添加微量組氨酸或色氨酸以培養(yǎng)細菌,可使細菌在最初的幾個小時內(nèi)生長并表現(xiàn)為背景苔蘚。當添加的組氨酸/色氨酸用盡時,只有突變菌才能繼續(xù)生長成可見的反向突變菌落。下面說說細菌回復(fù)突變試驗的數(shù)據(jù)處理與結(jié)果評價。 
  1、回復(fù)菌落計數(shù)
  直接計算培養(yǎng)基上的回復(fù)菌落數(shù),計算每個菌株每劑量三個平板上回復(fù)菌落數(shù)的平均值和標準差。
  2、合并方法的結(jié)果評價
  在良好的背景生長條件下,試驗菌株tal535、tal537、TA98和大腸桿菌的回復(fù)菌落數(shù)等于或大于未處理對照組的2倍,其他試驗菌株回復(fù)菌落數(shù)等于或大于未處理對照組的2倍,有下列1和2情況之一可判定為陽性結(jié)果:
  (1)劑量反應(yīng)關(guān)系;
 ?。?)一個測試點具有可重復(fù)的陽性結(jié)果。
  3、細菌回復(fù)突變試驗點試法的結(jié)果評價
  如果供試物樣紙周圍有m個較密集的回復(fù)菌落,與未處理的對照有顯著差異,可初步判定供試物突變試驗陽性,但應(yīng)通過摻入驗證。測試。
  4、驗證
  明顯的陽性結(jié)果無需驗證;可疑結(jié)果應(yīng)通過其他方法驗證;陰性結(jié)果需驗證(即重復(fù)),改變試驗條件,如劑量間隔(改為5倍間隔)等。
  5、對照組結(jié)果評價
  陽性結(jié)果表明受試物質(zhì)在受試菌株的基因組中引起點突變。陰性結(jié)果表明受試物質(zhì)在試驗條件下未對試驗菌株誘導(dǎo)基因突變。
 

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