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金霉素檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。往預(yù)先包被金霉素抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色，顏色的深淺和樣品中的金霉素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。
金霉素檢測試劑盒(定性)操作流程:
1、試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4°C。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50uL。
3、樣本孔中加入待測樣本50uL;空白孔不加。
4、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100uL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37°C水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液(350μL)，靜置1min,甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次。
6、每孔加入底物A.B各50uL,37°C避光孵育15min。
7、每孔加入終止液50uL,15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
金霉素檢測試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作，所有液體組分使用前充分搖勻。
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