293細胞系是從原代胚胎人類腎臟中建立的永丨久性細胞系人類腺病毒5型DNA。腺病毒E1區(qū)（E1a和E1b）編碼的基因是在這些細胞中表達，并參與病毒啟動子的反式激活，使這些細胞產(chǎn)生高水平的蛋白質(zhì)。E1還補充了重組腺病毒載體中的E1缺失，允許病毒復(fù)制。我們的293/Cas9細胞系穩(wěn)定表達Cas9和嘌呤霉素抗性基因。利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將Cas9和嘌呤霉素抗性基因?qū)胗H代293細胞。

圖：293/Cas9細胞系表達Cas9蛋白。293個細胞或293/Cas9細胞用RIPA緩沖液，并使用Cell Biolab的Cas9 ELISA試劑盒（Cat#PRB-5079）檢測Cas9蛋白水平。

Cell Biolabs 艾美捷293細胞系培養(yǎng)方法：

從冷凍細胞建立293/Cas9培養(yǎng)基：

1.將10毫升完整的DMEM生長培養(yǎng)基放入50毫升錐形管中。解凍冷凍的食物在37°C水浴中輕輕攪拌，在1-2分鐘內(nèi)冷凍細胞。凈化空氣用70%（v/v）乙醇擦拭冷凍瓶表面。

2.將解凍的細胞懸浮液轉(zhuǎn)移到含有10mL生長培養(yǎng)基的錐形管中。

3.在室溫下以1000 rpm的轉(zhuǎn)速離心5分鐘，收集細胞。移除通過抽吸培養(yǎng)基。

4.輕輕移液，將細胞重新放入錐形管中的15毫升新鮮生長培養(yǎng)基中然后倒下。

5.將15毫升細胞懸浮液轉(zhuǎn)移到T-75組織培養(yǎng)瓶中。將電池置于37°C的環(huán)境中培養(yǎng)箱中的二氧化碳濃度為5%。

6.每天監(jiān)測細胞密度。細胞應(yīng)在培養(yǎng)物達到95%匯合時傳代。

Cell Biolabs：細胞學(xué)試劑品牌，為生物技術(shù)和研究類客戶提供基于細胞功能研究以及疾病等方面的技術(shù)和服務(wù)。主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領(lǐng)域。

Cell Biolabs 相關(guān)研究方案：

1.CBA-100：細胞選擇™ 24孔細胞遷移試驗（波頓室試驗，比色法）

2.CBA-106：細胞選擇™ 96孔細胞遷移試驗（Boyden小室試驗，熒光法）

3.CBA-110：細胞選擇™ 24孔細胞侵襲試驗（波頓室試驗，比色法）

4.CBA-120：細胞選擇™ 24孔傷口愈合試驗

艾美捷科技是Cell Biolabs的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。