捻轉(zhuǎn)毛細線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒實驗操作:
1. 模板制備(樣本制備區(qū))
建議使用配套水生動物病害基因組 DNA/RNA 提取試劑盒系列產(chǎn)品,具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板(模板添加區(qū),放置于冰盒中進行)
請于-20℃條件下保存,有效期 12 個月
取出所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液 A-TSV-I 的 PCR 管,將試劑*解凍,離心 30 秒,在管蓋上標記管名(陰性對照管 NG、樣品 XX、陽性對照管 PG)。打開管蓋向各管管底分別加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I,蓋上陰性對照管管蓋,其他各管分別沿管壁加入 2μL 模板,順序為待測樣品模板、PG-TSV-I,依次蓋好各管管蓋,離心 30 秒,立即進行擴增反應(yīng)。
3. 擴增反應(yīng)(擴增及產(chǎn)物分析區(qū))
①恒溫儀器 63℃條件下反應(yīng) 60 min。待儀器升溫至 63℃后,新建程序,設(shè)置實驗名稱及反應(yīng)時間,將步驟 2中離心后的 PCR 反應(yīng)管放入恒溫熒光分子檢測儀,點擊開始檢測。
②若使用熒光定量 PCR 儀,則熒光基團選擇 FAM,淬滅基團選擇 None,將 63℃ 15 s,63℃ 45 s 作為一個循環(huán),于 63℃ 45 s 處收集熒光信號,60 個循環(huán)。
其他儀器請參照儀器說明書進行設(shè)置。
設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
人烏頭酸酶1(ACO1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human ACO1 (Aconitase 1) ELISA Kit
人羧肽酶E(CPE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human CPE (Carboxypeptidase E) ELISA Kit
人抗神經(jīng)節(jié)苷脂M1抗體(Anti-GM1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human Anti-GM1 (Anti-Ganglioside M1 Antibody) ELISA Kit
人絨毛膜促性腺激素α肽(CGα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human CGα (Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide) ELISA Kit
人血管緊張素III(Ang-III)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human Ang-III (Angiotensin III) ELISA Kit
人精氨酰tRNA合成酶(RARS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human RARS (Arginyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit
人成纖維細胞生長因子受體3(FGFR3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human FGFR3 (Fibroblast Growth Factor Receptor 3) ELISA Kit
人成纖維細胞生長因子受體4(FGFR4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human FGFR4 (Fibroblast Growth Factor Receptor 4) ELISA Kit
人二肽基肽酶X (DPP10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human DPP10 (Dipeptidyl Peptidase X) ELISA Kit
人細胞色素P450氧化還原酶(CPR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CPR (Cytochrome P450 Reductase) ELISA Kit
人細胞因子受體樣因子1(CRLF1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human CRLF1 (Cytokine Receptor Like Factor 1) ELISA Kit
人集落刺激因子2受體β (CSF2Rβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human CSF2Rβ (Colony Stimulating Factor 2 Receptor Beta) ELISA Kit
人碳酸酐酶III(CA3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human CA3 (Carbonic Anhydrase III, Muscle Specific) ELISA Kit
人抗胰島素受體抗體(AIRA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human AIRA (Anti-Insulin Receptor Antibody) ELISA Kit
人細胞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CYP1A1 (Cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 1) ELISA Kit
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。