大鼠血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基。它含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極其重要的作用。優(yōu)點(diǎn):血清中含有許多有利于細(xì)胞生長(zhǎng)的成分,提供豐富的營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。缺點(diǎn):血清的具體成分不明確,變量不易控制;血清保存期短,血清中可能含有揮發(fā)性物質(zhì);血清中可能含病毒等生物體,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生不良影響;使用血清的成本很高?! ?/div>
大鼠血清來(lái)源于非免疫大鼠宿主。脂質(zhì)提取和含NaN3的PBS溶液透析后,其透明度得到提高。建議用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍,配制5%-20%的工作液,直接滴在組織切片或細(xì)胞涂片上,37℃孵育10-30分鐘,取出血清無(wú)需洗滌,滴加適量稀釋的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃過(guò)夜。注意:封閉血清不能含有目的蛋白,與一抗不同,可以使用與二抗來(lái)源相同的封閉血清。
大鼠血清大鼠采血方法:
1、剪尾采血:這種方法常用于血液需求量較小的時(shí)候。先固定好動(dòng)物,將鼠尾浸入50℃左右的溫水中幾分鐘,或用酒精棉球或二甲苯擦拭鼠尾,填滿尾巴內(nèi)的血管,剪掉尾尖1~2mm(小鼠)或3~5mm(大鼠),便血沿血管壁自由流入試管或被血紅蛋白吸管吸收。采血結(jié)束后,對(duì)傷口進(jìn)行消毒,并用棉球按壓止血。在這種方法中,每只大鼠一般可以采血10次以上。每次可取小鼠約0.1ml血液,可取大鼠0.3~0.5ml血液。
2、眶后靜脈叢采血:操作者用一只手固定小鼠或大鼠,用拇指和食指盡可能捏住大鼠頭部的皮膚,或輕輕按壓頸部?jī)蓚?cè),使大鼠的眼球突出,眶后靜脈叢充血。另一只手握住毛細(xì)血管采血管,從內(nèi)眼角45°刺入,向下旋轉(zhuǎn)。感覺(jué)刺入靜脈叢后,它會(huì)后退并向外吸。達(dá)到所需血量后,放松頸部壓力,拔出采血裝置,防止穿刺孔出血。如果技術(shù)熟練,這種方法可以在短時(shí)間內(nèi)重復(fù)。小鼠一次可采血0.2~0.3ml,大鼠約可采血0.5ml。如果只取一次血,可以采用眼球抽取法。右手取一支眼科彎鉗,取出鼠標(biāo)左右眼球根部的眼球,將鼠標(biāo)倒置;低頭,抽血。
大鼠血清由健康大鼠血液經(jīng)無(wú)菌采集、分離和微孔過(guò)濾制成。具有液體清澈、無(wú)噬菌體、超低內(nèi)毒素、無(wú)溶血、無(wú)異物、無(wú)細(xì)菌真菌、支原體、支原體、衣原體等特點(diǎn)。適用于實(shí)驗(yàn)室或生化科研相關(guān)測(cè)試,滿足不同科研實(shí)驗(yàn)的各種需求。
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