二維液相作為一種強(qiáng)大有力的分離工具，已經(jīng)在越來(lái)越多的領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，而且隨著儀器控制及數(shù)據(jù)處理功能更具自動(dòng)化智能化的提高，也使得二維液相的使用也變得越來(lái)越簡(jiǎn)便，大有舊時(shí)王謝堂前燕，飛入尋常百姓家的勢(shì)頭，2020 版中國(guó)藥典中收載二維液相方法并用于維生素 D 的測(cè)定，無(wú)疑是對(duì)二維液相方法普及的一次“頂流宣傳”，錯(cuò)過(guò)了之前二維液相系列文章的同學(xué)可以戳過(guò)往文章鏈接看一看二維液相到底有多神奇：

復(fù)習(xí)過(guò)“歷史文章”之后，是不是感覺(jué)到熱血沸騰，躍躍欲試？不過(guò)，實(shí)際操作下來(lái)，卻發(fā)現(xiàn)事情并沒(méi)有看上去的那么簡(jiǎn)單：為什么我的方法在第二維上的分離和峰型總是有些不盡如人意？峰拖尾，分叉，保留弱，這些都是怎么回事？說(shuō)好的一次進(jìn)樣解千愁呢？  

恭喜同學(xué)，你已經(jīng)注意到了二維液相關(guān)鍵的核心問(wèn)題，這些情況的產(chǎn)生，都和維與第二維條件的兼容性相關(guān)。我們知道，二維液相優(yōu)勢(shì)就是利用維和第二維不同的選擇性增加方法的整體分離能力，這就要求維和第二維使用差異較大的色譜柱和流動(dòng)相條件，比如使用Hilic和反相機(jī)理組成的二維體系就是一個(gè)很典型的例子。  

接下來(lái)，就是要?jiǎng)澲攸c(diǎn)的部分了：由于溶劑的差異，維的流動(dòng)相溶劑在通過(guò)接口（二維切換閥）轉(zhuǎn)移到第二維的時(shí)候，不可避免的會(huì)對(duì)第二維分析產(chǎn)生影響，這種影響有點(diǎn)像我們做一般液相方法的時(shí)候遇到的“溶劑效應(yīng)”，從而導(dǎo)致第二維的色譜峰產(chǎn)生異常。

為了解決這個(gè)問(wèn)題，大家想了很多辦法，這些思路和解決溶劑效應(yīng)的思路很類似，可以概括為三大招式：  

1  //溶劑置換  

2  //減少進(jìn)樣量  

3  //在線稀釋減少餾分溶劑洗脫強(qiáng)度

招式一，顧名思義：就是簡(jiǎn)單明了的去除掉維的流動(dòng)相，然后再用第二維流動(dòng)相“復(fù)溶”樣品并進(jìn)行分析。當(dāng)然，這一切都是需要在接口部件上在線進(jìn)行的，所以這個(gè)過(guò)程略顯繁瑣：這就需要復(fù)雜的接口設(shè)計(jì)比如加熱，真空等實(shí)現(xiàn)去溶劑功能，這就讓設(shè)備構(gòu)造變得很復(fù)雜且操作十分不友好，除此之外，如果被測(cè)物比較不穩(wěn)定，或者維流動(dòng)相中有些無(wú)法去除的添加劑，就會(huì)嚴(yán)重限制這種方式的應(yīng)用，所以，招式一很快被打入了冷宮。  

于是，大家統(tǒng)一開(kāi)始研究看上去為簡(jiǎn)單易用的招式二，通過(guò)減小接口轉(zhuǎn)移進(jìn)第二維的餾分總量來(lái)達(dá)到控制溶劑效應(yīng)的目的，并且大家發(fā)現(xiàn)如果轉(zhuǎn)移餾分的體積與接口上用于手機(jī)餾分的loop環(huán)體積比值越小，去溶劑效應(yīng)的效果就越好，所以大家通常會(huì)采取“部分填充（PartialLoopFill）”的模式來(lái)轉(zhuǎn)移餾分，這種模式雖然操作簡(jiǎn)便，但是卻對(duì)第二維的靈敏度帶來(lái)了很大挑戰(zhàn)，而且也不能*洗脫一些強(qiáng)度非常大的維溶劑帶來(lái)的影響，所以招式二看來(lái)也并不具有可取之處。

圖一 部分填充方案示意圖（多中心切割模式）

雖然方式不甚適用，不過(guò)大家卻驚喜地發(fā)現(xiàn)：在減小填充率的同時(shí)，我們也在用第二維的起始流動(dòng)相稀釋餾分，在這個(gè)思路的指導(dǎo)下，大家很快開(kāi)發(fā)了招式三：在線稀釋，開(kāi)始的辦法是使用一個(gè)額外的稀釋泵通過(guò)三通將一路稀釋溶劑，在第二維色譜柱柱頭前與餾分混合以達(dá)到降低強(qiáng)度的目的。

圖二 稀釋泵方案示意圖（多中心切割模式）

這個(gè)方案看上去不錯(cuò)，不過(guò)大家也都知道，多一個(gè)泵就多一份錢，而且還要單獨(dú)編輯泵的參數(shù)，方案雖然合理，但還是有不足的。那么，能不能有兩全其美的辦法呢？答案當(dāng)然的，這就是安捷倫的主動(dòng)溶劑調(diào)制技術(shù)（Active Solvent Modulation，簡(jiǎn)稱 ASM 技術(shù)）

圖三 安捷倫主動(dòng)溶劑調(diào)制（ASM）接口閥（左）及多中心切割組件（右）

它將在線稀釋的功能巧妙的設(shè)計(jì)在接口閥上，可以利用第二維色譜泵的參數(shù)設(shè)置直接完成對(duì)餾分的稀釋而無(wú)需二外的稀釋泵，降低成本同時(shí)，也極大的簡(jiǎn)化了方法的設(shè)置操作，著實(shí)稱得上二維液相分析的*神器，下面我們就用*挑戰(zhàn)的Hilic加反相的模式來(lái)考驗(yàn)一下 ASM 接口的能力：

除了功能強(qiáng)大，ASM 的使用也非常簡(jiǎn)單，只需要在軟件上進(jìn)行簡(jiǎn)單設(shè)置，即可完成所有方法參數(shù)的編輯，這一版軟件真可以稱得上是友好的二維方法編輯界面了。

圖五 ASM 功能控制軟件界面

安捷倫 ASM 接口，一路走來(lái)，披荊斬棘，篳路藍(lán)縷，相信它的表現(xiàn)一定會(huì)不負(fù)眾望，給您帶來(lái)一個(gè)不一樣的二維分離體驗(yàn)。

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