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哺乳動物細(xì)胞真核表達(dá)系統(tǒng)的瞬時表達(dá)是通過轉(zhuǎn)染試劑完成的
哺乳動物細(xì)胞真核表達(dá)系統(tǒng)能表達(dá)天然結(jié)構(gòu)完整的重組蛋白，是廣泛應(yīng)用的人類復(fù)雜糖基化蛋白的表達(dá)系統(tǒng)，生物活性接近于天然蛋白質(zhì)，是活性蛋白因子及各類受體蛋白的表達(dá)系統(tǒng)，在生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用較廣, 60%以上的的藥用蛋白產(chǎn)品由哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)獲得。哺乳動物細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染能在短期內(nèi)快速表達(dá)高活性蛋白，滿足蛋白制備的需求。
哺乳動物細(xì)胞真核表達(dá)系統(tǒng)是通過脂質(zhì)體或者是PEI的等轉(zhuǎn)染試劑在體外通過和質(zhì)粒形成復(fù)合體， 將質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞后進行瞬時表達(dá)。稱為瞬時表達(dá)的原因是因為質(zhì)粒在真核細(xì)胞中不能擴增。并且不斷被細(xì)胞所降解，這種表達(dá)在一定的時間后就會消失。除非質(zhì)粒被整合進入細(xì)胞的基因組，通過質(zhì)粒上帶的篩選標(biāo)記，通過篩選得到一株穩(wěn)定表達(dá)你的目的蛋白的細(xì)胞克隆。但是這種細(xì)胞克隆的表達(dá)量相比瞬時表達(dá)會非常低甚至于檢測不到。
哺乳動物細(xì)胞真核表達(dá)系統(tǒng)特點：
表達(dá)水平高:載體可在哺乳動物細(xì)胞中高表達(dá)重組蛋白，表達(dá)量可高達(dá)1-3g/L。
蛋白表達(dá)高效穩(wěn)定：高效啟動子控制，穩(wěn)定表達(dá)，并可以選擇多種表達(dá)系統(tǒng)。
選項：瞬時表達(dá)、穩(wěn)定細(xì)胞株表達(dá)、營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞株表達(dá)、大規(guī)模懸浮細(xì)胞表達(dá)等。
適合大規(guī)模蛋白表達(dá):常用的哺乳動物表達(dá)宿主細(xì)胞，使用懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，可以在一個月內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)克級蛋白。
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