產(chǎn)品介紹：

PureCube Rho1D4 Agarose是針對(duì)Rho1D4標(biāo)簽?zāi)さ鞍椎挠H和層析產(chǎn)品，Rho1D4是一種含有9個(gè)氨基酸的長(zhǎng)鏈親和標(biāo)記物(TETSQVAPA)，可用于高特異性親和蛋白純化。庫(kù)柏生物的PureCube Rho1D4瓊脂糖純化樹(shù)脂是為FPLC蛋白的純化測(cè)定而制造的。具有Rho1D4標(biāo)簽的膜蛋白可以通過(guò)PureCube Rho1D4 Agarose，利用Rho-tag高特異性來(lái)純化，它在蛋白質(zhì)產(chǎn)量和純度方面甚至勝過(guò)更常用的Flag-Tag標(biāo)記。本產(chǎn)品由通過(guò)Rho1D4抗體進(jìn)行功能化40 µm瓊脂糖微球組成。德國(guó)Cube Biotech研發(fā)團(tuán)隊(duì)擁有逾40年經(jīng)驗(yàn)在膜蛋白的表達(dá)、純化和結(jié)晶等研究經(jīng)驗(yàn)，為您提供專用于膜蛋白純化的Rho1D4系列高質(zhì)量PureCube Rho1D4瓊脂糖填料、磁珠和預(yù)裝柱，以及具有較高流速XL瓊脂糖同系列產(chǎn)品。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

1）德國(guó)制造，歐美膜蛋白純化產(chǎn)品供應(yīng)商

2）膜蛋白純化的理想解決方案，可以獲得純凈且活性的膜蛋白；
3）結(jié)合能力可高達(dá)3-4mg/mL；
4）高度特異性純化帶有標(biāo)簽的重組膜蛋白；
5）可重復(fù)再生使用；
6）良好的流量分布和最小空隙體積；
7）兼容常用的色譜儀器；
8）配合Nanodisc使用，是目前非常有效的膜蛋白提取解決方案，數(shù)家科研院校正在使用；
9）高性價(jià)比的膜蛋白純化產(chǎn)品！

 
產(chǎn)品詳解：
對(duì)膜蛋白提取有高特異性和高產(chǎn)量
每個(gè)批次的PureCube凝膠均是按照嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系生產(chǎn)并嚴(yán)格檢驗(yàn)，以確保每一批分裝的產(chǎn)品都有高的蛋白結(jié)合能力。通過(guò)與特異性抗原表位相互作用，輔以優(yōu)化過(guò)的純化操作步驟，能使目標(biāo)蛋白在洗脫組分中有高產(chǎn)出量。圖1是對(duì)CXC趨化因子受體4(CXCR4)的純化溶于Fos-Choline®-14的帶標(biāo)簽蛋白通過(guò)大腸桿菌表達(dá)，再經(jīng)由含PureCube Rho1D4瓊脂糖的層析柱純化。用Rho1D4多肽作為洗脫液，4次洗脫組分每毫升共收集到0.8mg、1.0mg、0.85mg和0.6mg目標(biāo)蛋白。蛋白印跡結(jié)果說(shuō)明CXCR4大約是65 kDa和35 kDa。這些條帶是39.7 kDa膜蛋白的二聚體和單體。單體、二聚體的分離以及去除洗脫肽段，可以通過(guò)排阻層析的方法實(shí)現(xiàn)。

圖1：用PureCube Rho1D4瓊脂糖純化CXCR4。
大腸桿菌裂解液（TL）溶解在Fos-Choline®-14中，溶解的組分（SF）與裝有Rho1D4抗體的免疫親和層析柱相結(jié)合。平衡組分中沒(méi)有測(cè)得損失目標(biāo)蛋白，經(jīng)分光光度計(jì)測(cè)定，CXCR4在洗脫組分（E1-E4）中得濃度范圍在0.6-1.0mg/mL。

           
表1：有文獻(xiàn)報(bào)道的使用Rho1D4系統(tǒng)純化膜蛋白的純度和產(chǎn)率。

盡管很多用Rho1D4系統(tǒng)純化的膜蛋白均為G蛋白偶聯(lián)受體家族，該系統(tǒng)也可以有助于辨別其他如轉(zhuǎn)運(yùn)體之類的膜蛋白。 IAC：免疫親和層析；SEC：排阻層析。
在20世紀(jì)80年代發(fā)現(xiàn)Rho1D4表位和配對(duì)抗體，當(dāng)時(shí)通過(guò)將抗體偶聯(lián)到Sepharose®上來(lái)純化在猴腎細(xì)胞中表達(dá)的牛視紫紅質(zhì)。自此，Rho1D4系統(tǒng)（標(biāo)簽，偶聯(lián)抗體的親和基質(zhì)，洗脫肽）開(kāi)始用于少量膜蛋白的純化，包括G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR），ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)體，溶質(zhì)反向轉(zhuǎn)運(yùn)體和一個(gè)四次跨膜蛋白。

圖2：假設(shè)有3個(gè)跨膜域的膜蛋白。Rho1D4標(biāo)簽加到膜蛋白C端，它的序列是T-E-T-S-Q-V-A-P-A

通過(guò)轉(zhuǎn)基因修飾在目標(biāo)膜蛋白的C端（或N端）加上Rho1D4標(biāo)簽（如圖1）。一旦配有該序列，即可用裝載有Rho1D4抗體的親和基質(zhì)捕獲目標(biāo)蛋白，并隨后通過(guò)添加過(guò)量Rho1D4多肽，產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合基質(zhì)表面抗體來(lái)洗脫目標(biāo)蛋白，用此方法洗脫比改變pH值等方式更加溫和。
Rho1D4系統(tǒng)的一大優(yōu)勢(shì)是抗體與表位相互作用特異性非常高。而其另一大優(yōu)勢(shì)是洗脫目的蛋白收率相當(dāng)高。利用Rho1D4純化的目標(biāo)蛋白可用于功能性研究，如：配體結(jié)合的特性，蛋白與蛋白間的相互作用。
*純度是從低濃度經(jīng)一步Rho1D4 IAC在反應(yīng)溶液中得出的；產(chǎn)率是在洗脫成分濃縮并過(guò)SEC柱后計(jì)算。

 
技術(shù)參數(shù)：

相關(guān)產(chǎn)品:

1. 所有PureCube系列瓊脂糖產(chǎn)品均提供用于自動(dòng)液相色譜系統(tǒng)（如：FPLC）的預(yù)裝柱（提供1mL）；

2. 用于稀釋樣品或用于pull-down實(shí)驗(yàn)，我們推薦使用PureCube Rho1D4 Magbeads磁珠；

3. Rho1D4抗體：這種抗體作為分離物質(zhì)來(lái)生產(chǎn)PureCube的Rho1D4瓊脂糖。也可以在Western Blot實(shí)驗(yàn)或者ELISA實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)rho-tagged蛋白；

4. Rho1D4多肽：在洗脫緩沖液中，Rho1D4多肽競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合到親和層析凝膠上然后釋放標(biāo)簽蛋白,相對(duì)于改變洗脫液的pH值來(lái)說(shuō)提供了更溫和的洗脫環(huán)境。Cube Biotech 提供了一系列的Rho1D4肽段，這些肽段已經(jīng)被PureCube Rho1D4瓊脂糖驗(yàn)證；

5. 配合Nanodisc產(chǎn)品使用，是有效的膜蛋白提取解決方案。

6. Rho1D4多肽可以單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)，也可以購(gòu)買(mǎi)PureCube Rho1D4試劑盒套裝。詳情請(qǐng)參見(jiàn)訂貨信息以及公司。

What our customers say:

訂購(gòu)信息:

References:

1. Mattle D. et al.(2015). Mammalian Expression, Purification, and Crystallization of Rhodopsin Variants. In: Jastrzebska B. (eds) Rhodopsin. Methods in Molecular Biology, vol 1271. Humana Press, New York, NY
 

2. Brosig, A. et al (2019). The Axonal Membrane Protein PRG2 Inhibits PTEN and Directs Growth to Branches. Cell Reports. 29. 2028-2040.e8. 10.1016/j.celrep.2019.10.039.
 

3. Ahmed, Chulbul M., et al. "SRD005825 Acts as a Pharmacologic Chaperone of Opsin and Promotes Survival of Photoreceptors in an Animal Model of Autosomal Dominant Retinitis Pigmentosa." Translational Vision Science & Technology 8.6 (2019): 30-30.
 

4. Liu, Da-Wei et al. (2018). The Cone Opsin Repertoire of Osteoglossomorph Fishes: Gene Loss in Mormyrid Electric Fish and a Long Wavelength-Sensitive Cone Opsin That Survived 3R. Molecular Biology and Evolution. 10.1093/molbev/msy241.
 

5. Kotov, Vadim et al. (2019). High-throughput stability screening for detergent-solubilized membrane proteins. Scientific Reports. 9. 10.1038/s41598-019-46686-8.

成都正民德思生物科技有限公司致力于成為中國(guó)與世界生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的紐帶，以務(wù)實(shí)的原則將歐洲高科技、高質(zhì)量、高效能的產(chǎn)品引進(jìn)中國(guó)。正民德思從2013年起至今，作為生物制藥和體外診斷領(lǐng)域相關(guān)產(chǎn)品的供應(yīng)商，秉承“為客戶增值”的企業(yè)價(jià)值觀提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)，通過(guò)對(duì)合作伙伴、客戶及社會(huì)的契約責(zé)任的高度重視，已積累與中國(guó)、德國(guó)、西班牙、奧地利、美國(guó)、芬蘭等眾多生命科學(xué)企業(yè)、生物技術(shù)公司、制藥公司、科研院校的合作經(jīng)驗(yàn)，并獲得合作伙伴和客戶的高度認(rèn)可并保持穩(wěn)固的戰(zhàn)略合作關(guān)系，互相支持、共同發(fā)展。

目前，成都正民德思生物科技有限公司作為德國(guó)蛋白純化產(chǎn)品生產(chǎn)商/服務(wù)商Cube Biotech生物科技公司中國(guó)總代理、西班牙生物磁性分離設(shè)備制造商SEPMAG中國(guó)總代理、西班牙免疫診斷試劑研發(fā)服務(wù)商Pragmatic Diagnostics公司的中國(guó)戰(zhàn)略合作方，在成都成立Cube Biotech、SEPMAG和Pragmatic Diagnostics的中國(guó)總部辦事處，全權(quán)負(fù)責(zé)在中國(guó)地區(qū)的營(yíng)銷事務(wù)、銷售及售后服務(wù)等所有工作。