檢驗科收到臨床標本后,應(yīng)盡快低速離心分離血清或血漿進行測定。45℃水浴10分鐘,再3000r/min離心5分鐘,即可使LDH、K等顯著升高。對血液標本外觀觀察是判斷標本質(zhì)量的最直觀的方法,外觀異常有溶血、黃疸、脂血等情形,是引起測定誤差最常見的因素。
(1)標本的離心離心分離血清應(yīng)選擇相對離心力(RCF)為1000g~1200g,離心時間為5~10分鐘。增加相對離心力或增加離心時間,都易引起溶血。
(2)溶血標本的處理溶血可導(dǎo)致RBC內(nèi)多種成分的釋出,引起對測定方法的干擾,Hb≥0.2g/L,肉眼可見溶血。
①間接干擾:Hb的釋出,可引起間接的干擾,因Hb在波長為431nm和555nm處有光吸收,若被測物選用與之相近波長作比色分析時,可導(dǎo)致假性增高。處理方法:輕度溶血,同時作血清空白;嚴重溶血,重留樣本。
②直接干擾:RBC內(nèi)含量高的血液化學(xué)成分溶血后,這些化學(xué)成分在血清中濃度就會增高,避免用溶血標本測定在RBC內(nèi)含物高的化學(xué)成分。如鉀、ALP、AST、Bil、CK、LD.ACP等。
(3)乳糜標本的處理高脂血癥的病人往往可導(dǎo)致乳糜血,為了不影響檢測,應(yīng)對乳糜血進行澄清。具體方法如下:血清和(或)血漿與氟利昂以1:1在玻璃試管中混合。氟利昂在血漿和(或)血清下,180℃顛倒試管3min,使充分混合。然后3000g離心6min.上清液為澄清的血清,中層含沉淀的脂蛋白,下層為多余的氟利昂,澄清過程可重復(fù)多次而不影響酶的活性和底物。
(4)膽/紅素(黃疸)標本的處理膽/紅素的顏色對反應(yīng)結(jié)果為黃色和紅色化合物的比色分析有正向干擾,可用樣品空白或動力學(xué)和雙試劑消除。另外,膽紅/素不穩(wěn)定,在堿性環(huán)境或強光線照射下,轉(zhuǎn)變?yōu)槟懢G素、膽褐素而褪色,如用堿性苦味/酸法測定肌酐,黃疸標本常常會出現(xiàn)負數(shù)。另外膽/紅素還有還原性,對Trinder反應(yīng)有負干擾,如氧化酶法測定葡萄糖、膽/固醇、甘油三脂、尿酸等,可通過進行干擾試驗消除恒定誤差。
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