国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術中心>選購指南>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

肌動蛋白(牛心臟 muscle)生物活性測定

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2022年05月18日 16:40  

艾美捷肌動蛋白(牛心臟 muscle)采用PardeeSpudich法從牛心肌中純化肌動蛋白。牛心臟肌動蛋白由84%的α心臟肌動蛋白和16%的α骨骼肌動蛋白亞型組成,分子量約為43 kDa。牛心臟肌動蛋白純度大于99%,以白色凍干粉末的形式提供。

 

艾美捷肌動蛋白(牛心臟 muscle)存儲和重建:

短暫離心以收集管底部的產(chǎn)品。凍干蛋白質在4°C條件下干燥至<10%濕度時,可穩(wěn)定儲存6個月。應使用100µl蒸餾水將蛋白質重組至10 mg/ml。然后將蛋白質置于以下緩沖液中:5 mM Tris-HCl pH 8.0、0.2 mM CaCl20.2 mM ATP、5%w/v)蔗糖和1%w/v)葡聚糖。然后將濃縮的蛋白質等分為實驗量,在液氮中快速冷凍,并在-70°C下儲存。如果在-70°C下儲存,蛋白質可穩(wěn)定6個月。對于工作濃度,應使用添加0.2 mM ATPCat.#BSA01,見試劑清單)和0.5 mM DTT的通用肌動蛋白緩沖液(Cat.#BSA04)進一步稀釋蛋白質。肌肉肌動蛋白是一種不穩(wěn)定的蛋白質,應小心處理。避免重復凍融循環(huán)。

 

蛋白質純度通過12%聚丙烯酰胺凝膠上考馬斯藍染色蛋白質的掃描密度測定來確定。發(fā)現(xiàn)心臟肌動蛋白的純度>99%(見圖1)。

637884886182458564115.jpg

圖1:心臟肌動蛋白純度測定。在12%SDS-PAGE系統(tǒng)中通過電泳分離100µg牛心臟肌動蛋白樣品(分子量約43 kDa),并用考馬斯藍染色。用精密紅色蛋白質分析試劑(Cat.#ADV02)測定蛋白質定量。Mark12分子量標記來自Invitrogen。

 

艾美捷肌動蛋白(牛心臟 muscle)生物活性測定:

心臟肌動蛋白的生物活性可以通過其在體外有效聚合成細絲并在降速分析中與未聚合成分分離的能力來確定。嚴格的質量控制確保在該試驗中,90%以上的肌肉肌動蛋白可以聚合。

 

關于心臟肌動蛋白的建議:

1.在缺乏ATP、二價陽離子和二硫蘇糖醇(DTT)的情況下,單體肌動蛋白不穩(wěn)定

2.單體肌動蛋白將在>2 mM K+Na+、和>0.05毫米Mg2+。

3.單體肌動蛋白在pH值低于6.5或高于pH8.5時不穩(wěn)定。

4.聚合肌動蛋白比單體肌動蛋白更能抵抗不利條件。因此,肌動蛋白最好以聚合形式在4°C下儲存數(shù)周。如果薄膜的儲存時間超過24小時,建議添加抗菌劑,如0.05%

die氮化鈉或100 ug/ml氨芐西林和10µg/ml氯霉素。

5.將肌動蛋白在液氮中以10毫克/毫升的速度快速冷凍,以保持6個月的高生物活性。


免責聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
  • 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
宣城市| 博客| 台江县| 珠海市| 安岳县| 淮滨县| 建昌县| 景宁| 大关县| 罗山县| 西峡县| 秀山| 都昌县| 巍山| 如东县| 黎平县| 哈尔滨市| 潼关县| 大洼县| 叙永县| 堆龙德庆县| 广安市| 仁寿县| 花莲县| 凤庆县| 拉孜县| 二手房| 马关县| 剑河县| 泰宁县| 长春市| 泽库县| 铜梁县| 开化县| 武川县| 钦州市| 南投县| 永泰县| 江北区| 彭水| 龙游县|