手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
徠卡高壓冷凍儀的這些知識(shí)值得我們學(xué)習(xí)
冷凍電鏡技術(shù)簡(jiǎn)化，并將其應(yīng)用在生物分子成像方向，打破了長(zhǎng)期以來(lái)解析蛋白必須依靠傳統(tǒng)X射線晶體學(xué)（X-raycrystallography），核磁共振(NMR)的手段，使我們?cè)诮趦?nèi)很有可能獲得原子級(jí)別分辨率下的生命復(fù)雜機(jī)制的詳細(xì)圖像。
徠卡高壓冷凍儀是通過(guò)液氮制冷，通過(guò)空氣壓縮機(jī)提供壓力來(lái)源，通過(guò)物理原理可使局部壓強(qiáng)達(dá)到2100拔，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)含水樣本的高壓冷凍固定, 冷凍固定后樣品經(jīng)后續(xù)處理（冷凍替代/常溫超薄切片，冷凍超薄切片或冷凍斷裂等）供電子顯微鏡觀測(cè)。能在毫秒級(jí)別內(nèi)大程度地保存樣品生活狀態(tài)的原始真實(shí)信息，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、酶/抗原活性無(wú)變化，可溶性離子及小分子得到有效固定等等，有效避免了常規(guī)化學(xué)固定帶來(lái)的假象。除了可以結(jié)合冷凍切片，完成CEMOVIS的工作外，它還可以結(jié)合冷凍斷裂，冷凍替代等來(lái)觀察樣品的內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)或進(jìn)行免疫學(xué)的相關(guān)工作。除此之外，它還可以結(jié)合光刺激和電刺激，為神經(jīng)生理學(xué)家打開(kāi)了一扇新的大門。
徠卡高壓冷凍儀的制備程序可為兩類：
1.無(wú)溶液制備法：包括取材、快速冷蹤、冷凍替代、切片、干燥、染色或不染色、鏡檢等幾個(gè)步驟。主要用于可溶性物質(zhì)的放射白顯影和X射線微區(qū)分析。
2.固定樣品制備法：包括取材、樣品包埋或不包埋、冷凍保護(hù)處IR、快速冷凍切片、染包及鏡檢等步驟。適用于進(jìn)行形態(tài)學(xué)、細(xì)胞化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)研究。
徠卡高壓冷凍儀的主要技術(shù)路線是： 通過(guò)冷凍制樣技術(shù)（高壓冷凍，保存樣品原始的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)信息），制備得到冷凍超薄切片（或通過(guò)投入冷凍技術(shù)冷凍樣品），之后借助冷凍光鏡觀察熒光標(biāo)記位置，記錄感興趣的位置，然后在冷凍TEM中實(shí)現(xiàn)原位電鏡觀察，從而實(shí)現(xiàn)光鏡電鏡聯(lián)用技術(shù)。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心