心肌黃酶是一類普遍存在的黃素結(jié)合酶,其催化從還原形式的二和三磷酸吡啶核苷酸即NADH、NADPH中充當(dāng)氫受體的各種染料的還原。種被純化的酶是來自心肌的酶(Straub 1939)。近二十年后,心臟心肌黃酶被證明與硫辛酰脫氫酶相同(Massey 1958, 1963)。其他心肌黃酶已被描述并從各種細(xì)菌、植物和哺乳動物器官中純化。部分純化的克氏梭菌提取物的心肌黃酶活性細(xì)胞,最初被描述為 NADH 和 NADPH 氧化酶的來源(Ciotti 和 Kaplan 1957),在該實驗室中進(jìn)行了觀察,并將其用于脫氫酶和乙醇的耦合比色測定。(泰勒 1958 年)。這些基于 2,6-二氯苯酚吲哚酚脫色的方法通過使用還原后顯色的四唑鎓染料進(jìn)行了改進(jìn)。(Brower 和 Woodbridge 1970;Nachlas 等人 1960)。
來自Cl 的酶。kluyveri 已被 Kaplan、Setlow 和 Kaplan (1969) 純化和表征,他們使用與目前的 Worthington 產(chǎn)品等效的起始材料。
Worthington 艾美捷克氏梭菌心肌黃酶的特性:
除非另有說明,以下數(shù)據(jù)來自 Kaplan等人。(1969 年)。
分子量:24,000
蛋白質(zhì)登錄號:Q97E86(丙酮丁醇梭菌)
組成:該酶每分子含有一分子黃素單核苷酸。氨基酸組成已確定。
J佳 pH 值:8.5。在 pH 7.4 和 9.4 時,活性降低了 50%。NADH 和 NADPH 都共享這個*值。
常數(shù):據(jù)報道,NADH 的 Km 為 9 X 10 -5,而 NADPH 則低得多。
抑制劑:N-乙基馬來酰亞胺在濃度低于 5 mM 時使心肌黃酶失活。
活化劑:我們發(fā)現(xiàn)過量的黃素單核苷酸 (FMN) 似乎會輕微刺激與二氯苯酚-吲哚酚的反應(yīng)。
特異性:NADH 或 NADPH 均可用作還原劑。然而,輔酶之間沒有催化氫交換。氧和細(xì)胞色丨素 C 都不會被Cl 還原??唆斁S心肌黃酶。
穩(wěn)定劑:NADH、NADPH 和 FMN 保護(hù)酶免受尿素和胍的變性。
穩(wěn)定性:雖然具有合理的穩(wěn)定性,但如果長時間保存,干酶應(yīng)儲存在冰箱中。尤其是溶液,應(yīng)始終遠(yuǎn)離強(qiáng)光。
Worthington相關(guān)研究:
果膠酶 WBC-LS004298
蛋白酶 K, Recombinant, Solution WBC-LS004258
堿性磷酸酶, Purified WBC-LS004234
膠原蛋白酶, Type 1, Filtered WBC-LS004217
Worthington專注于生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。其核心酶包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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