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艾美捷sGAG檢測試劑盒,Blyscan染料來助攻!

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2022年06月07日 16:51  

Glucosamine Sulfate,用于預(yù)防和治療各種類型的骨性關(guān)節(jié)炎,如膝關(guān)節(jié)、髖關(guān)節(jié)、脊柱、肩、手、手腕和踝關(guān)節(jié)等部位的及全身性的骨性關(guān)節(jié)炎。本藥可直接抗炎,緩解骨性關(guān)節(jié)炎的疼痛癥狀,改善關(guān)節(jié)功能,并阻止骨性關(guān)節(jié)炎病程的發(fā)展。且不會出現(xiàn)因前列腺素受抑制而引起的不良反應(yīng)。

 

接下來小編給大家說的這個艾美捷sGAG檢測試劑盒——專門用于檢測樣本中的硫酸氨基聚糖,它采用常規(guī)生化方法,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線和比色,可定量分析總硫酸化多糖(氨基聚糖和蛋白聚糖)的含量,亦可測定O端和N端硫酸氨基多糖的比值。主要起作用的是Blyscan染料,它可以特異性的與氨基聚糖和蛋白聚糖上的硫酸多糖組分結(jié)合,該方法不適于檢測已經(jīng)降解的硫酸化雙糖片段。

 

艾美捷sGAG檢測試劑盒的特點(diǎn):

可檢測廣泛的蛋白多糖,可檢測的氨基多糖包括硫酸角質(zhì)素、硫酸皮膚素、硫酸肝素,不適合檢測包含海藻酸的樣品,因?yàn)樗鼈兒刑侨┧?。該試劑盒也不能對透明質(zhì)酸定量,但透明質(zhì)酸并不會對硫酸化氨基多糖的檢測產(chǎn)生干擾。細(xì)胞培養(yǎng)基中20%的胎牛血清也不會干擾實(shí)驗(yàn)。該方法檢測靈敏度為5ug,所需時間為1小時。

 

艾美捷sGAG檢測試劑盒檢測樣本:

可來自軟骨組織、動脈組織、肺組織、皮膚組織、腫瘤組織、細(xì)胞核組織提取物、細(xì)胞培養(yǎng)液、羊水和尿液

 

Blyscan檢測流程圖:

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艾美捷sGAG檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟 :

1. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

2. 待測樣品的處理:

50ul待測樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如果反應(yīng)物在656nm初的吸收峰大于1.5,則對樣品進(jìn)行稀釋,待測樣樣品濃度落入標(biāo)準(zhǔn)曲線中段時,準(zhǔn)確度較高。

3. 硫酸氨基聚糖—染料復(fù)合物的獲得

1.0mlBlyscan染料溶液到待測樣本中,充分混勻,待不溶物出現(xiàn),離心,棄上清,則獲得紫色的硫酸氨基聚糖—染料復(fù)合物

4. 硫酸氨基聚糖—染料復(fù)合物中染料的釋放

加入1.0ml的染料釋放劑,充分混勻。溶解5min以上,使染料充分釋放

5. 測定

用分光光度計(jì)于波長656nm處測定,或使用colorimeter紅色濾光片測定

 

sGAG檢測試劑盒已發(fā)表文章,超500篇,僅摘錄展示部分:

1Ahn, G., Min, K., Kim, C., Lee, J., Kang, D., reports, J. W.-S., & 2017 Precise stacking of decellularized extracellular matrix based 3D cell-laden constructs by a 3D cell printing system equipped with heating modules. Nature.

2、Makris, E., & Responte, D. (2014). Developing functional musculoskeletal tissues through hypoxia and lysyl oxidase- induced collagen cross-linking. PNAS 111, E4832 E4841.

3、Prewitz,M.C., Seib,F.P., von Bonin,M., Friedrichs,J., Sti+ el,A., Niehage,C., M++ller,K., Anastassiadis,K., Waskow,C. and Hoflack,B. (2013) Tightly anchored tissue-mimetic matrices as instructive stem cell microenvironments. Nature Methods 10, 788 794

4Song,J.J., Guyette,J.P., Gilpin,S.E., Gonzalez,G., Vacanti,J.P. and Ott,H.C. (2013) Regeneration and experimental orthotopic transplantation of a bioengineered kidney. Nature medicine, 19, 646-651.


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