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披沙煉金 | 配方顆粒色譜柱推薦之廣金錢草檢測

來源：安捷倫科技（中國）有限公司 2022年06月13日 17:15

在上期文章中，我們主要為大家梳理并推薦了適用于各類中藥配方顆粒檢測的安捷倫色譜柱，并對其使用及日常維護進行了相關(guān)耗材推薦。相信這滿滿的干貨，一定讓大家意猶未盡。那么本期就讓我們持續(xù)輸出，為大家?guī)?/span>關(guān)于廣金錢草配方顆粒檢測的色譜柱推薦。趕緊跟上，一起出發(fā)吧！

本實驗選用的色譜柱 InfinityLab Poroshell 120 SB-C18 采用 Agilent 專有的表面多孔型填料技術(shù)，其 2.7 μm 色譜柱的柱效能媲美亞二微米全多孔類型的色譜柱，但柱壓僅有其一半。特征譜圖采用的 Poroshell 120 SB-C18 2.1x150mm，2.7μm 色譜柱盡管與原標準中 1.6 μm 的色譜柱相比柱效低一些，但結(jié)果*符合標準的規(guī)定。同時柱頭采用較大的 2 μm 篩板能耐受更“臟”的樣品，有利于提高色譜柱的耐受性。

根據(jù)國家藥品監(jiān)督管理局《國家藥品標準》中廣金錢草配方顆粒的檢測項目，對其特征譜圖和含量測定都采用高效液相色譜法。特征譜圖測定中要求理論板數(shù)按夏佛塔苷峰計算應(yīng)不低于 10000，以及對供試品應(yīng)呈現(xiàn)的特征峰相對保留時間和相對峰面積做了規(guī)定。含量測定中規(guī)定了理論板數(shù)按夏佛塔苷峰計算應(yīng)不低于 5000。

特征譜圖

實驗結(jié)果

圖 1. 廣金錢草配方顆粒供試品的特征譜圖與標準中對照譜圖的比較（峰 3(S)：夏佛塔苷）

色譜條件：

流動相：A：0.1% 磷酸；B：乙腈

梯度：0-10min，15%B；10-11min，15%B-16%B；11-20min，16%B

流速：0.2 ml/min

柱溫：30 °C

檢測波長：340 nm(4nm), Ref: off; 采樣頻率：20Hz

進樣量：1 μL

系統(tǒng)適用性結(jié)果見下表：

結(jié)果

1）供試品色譜中呈現(xiàn)標準中規(guī)定的 7 個特征峰，且相對保留時間都在規(guī)定范圍內(nèi)；

2）峰 6 與 S 峰的相對峰面積在規(guī)定范圍內(nèi)；

3）理論板數(shù)按夏佛塔苷峰計算為 19402，大于規(guī)定值 10000，結(jié)果符合要求。

含量測定

實驗結(jié)果

圖 2. 廣金錢草配方顆粒供試品含量測定 HPLC 法和 UHPLC 法譜圖對照

色譜條件：

流動相：A：65% 0.1% 磷酸；B：35% 甲醇

流速：1 ml/min (HPLC 法)；0.4 ml/min (UHPLC法)

柱溫：30 °C

檢測波長：340 nm(4nm), Ref: off; 采樣頻率：2.5Hz(HPLC)；20Hz(UHPLC)

進樣量：5 μL (HPLC法)；1 μL (UHPLC法)

系統(tǒng)適用性結(jié)果見下表：

結(jié)果

1）主峰夏佛塔苷峰型對稱，分離度符合含量測定要求，理論板數(shù)符合標準中的規(guī)定；

2）方法從 HPLC 轉(zhuǎn)移到 UHPLC，分析時間縮短至原來的 1/6。

實驗結(jié)論

本實驗選用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 SB-C18 和 ZORBAX SB-C18 色譜柱對廣金錢草配方顆粒特征譜圖及含量進行了檢測，均符合標準中對系統(tǒng)適用性的要求。本方法可用于廣金錢草配方顆粒的分離和檢測，為該配方顆粒的質(zhì)量保證提供檢測依據(jù)。

儀器系統(tǒng)及色譜柱推薦

1290 四元 UHPLC 系統(tǒng): 全能泵(G7104A)，自動進樣器(G7167B)，柱溫箱(G7116B)，DAD(G7117B)

1260 四元 UHPLC 系統(tǒng): 四元泵(G7111B)，自動進樣器(G7129A)，柱溫箱(G7116A)，DAD(G7115A)

其它詳細操作可以參考 Agilent 配方顆粒圖譜集，或聯(lián)系 Agilent。

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