ultra液相色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時間,并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場上色譜柱種類繁多,不同類型的色譜柱分離對象不同,因此,要做合適的選擇,要對此有一定的認識和了解。
ultra液相色譜柱是色譜分析過程中重要的部分,相當于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數(shù)將會造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。
即使是液相色譜柱也分很多類型,比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素,才能結合目標分析物的性質、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。
在設定選擇樣品分析的HPLC方法時,首先需要根據(jù)化合物的分子量大小,極性大小等因素選擇合適的分離模式,在適當?shù)姆蛛x模式下去選擇合適的色譜柱及流動相。
柱效率與柱半徑平方成反比,內(nèi)徑越小柱效越高,但內(nèi)徑越大,柱容量也增加,允許進樣量就越多。當進樣量超過柱容量時,則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立平衡,將會導致色譜蜂畸變,柱分辨率降低,重現(xiàn)性不好。
因此對于復雜樣品需要準確分離,要使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就要使用內(nèi)徑大的柱子,目前實驗室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
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