摘要：鄰苯二甲酸酯在柔性乙烯制品和化妝品中通常作為添加劑使用。由于鄰苯二甲酸酯的毒 性與其在人們?nèi)粘Ｉ钪休^高的暴露濃度，使得鄰苯二甲酸酯分析的關(guān)注度日益增加。 本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)詳細(xì)討論了利用 Agilent Chem Elut 5 mL 無(wú)緩沖的固相支持液/液萃取 (SLE) 柱 對(duì)嬰兒洗發(fā)水/沐浴露中的四種鄰苯二甲酸酯（鄰苯二甲酸二乙酯、鄰苯二甲酸二丙酯、 鄰苯二甲酸丁芐酯和鄰苯二甲酸二環(huán)己酯）進(jìn)行萃取和分析。使用配備二極管陣列檢測(cè) 器的 Agilent 1200 Infinity 系列液相色譜儀對(duì)鄰苯二甲酸酯進(jìn)行分離和定量分析。采用報(bào) 道的 SLE 方法進(jìn)行萃取能夠使鄰苯二甲酸酯的回收率達(dá)到 91% 至 108%。

前言 鄰苯二甲酸酯是一類化合物，通常在柔性乙烯制品中用作添加劑 或在化妝品中作為溶劑或固定劑 [1,2]。它們主要作為增塑劑，用 來(lái)促進(jìn)沐浴露和潤(rùn)膚露的吸收 [2,3]。鄰苯二甲酸酯的使用會(huì)擾亂 人體內(nèi)的激素平衡，引起生殖問(wèn)題 [4]，已報(bào)道它們能夠造成男性 精子數(shù)嚴(yán)重偏低 [5]。美國(guó)國(guó)家環(huán)境保護(hù)局 (EPA) 對(duì)鄰苯二甲酸酯 的關(guān)注主要是由于此類物質(zhì)有毒，且人們會(huì)在日常生活中通過(guò)各 種化妝品和塑料材料接觸高含量的鄰苯二甲酸酯。暴露于鄰苯二 甲酸酯中可能引起兒童生殖系統(tǒng)的發(fā)育問(wèn)題。2008 年的一項(xiàng)研究 表明，嬰兒的鄰苯二甲酸酯暴露非常普遍。研究顯示，嬰兒尿液 樣品中檢測(cè)到的高濃度鄰苯二甲酸酯與（據(jù)報(bào)道）嬰兒奶粉、嬰 兒潤(rùn)膚露和嬰兒洗發(fā)水的使用有關(guān) [6]。 在以下實(shí)驗(yàn)中，我們通過(guò)固相支持液/液萃取 (SLE) 和液/液萃取 (LLE) 法從加標(biāo)的洗發(fā)水/沐浴露樣品中萃取鄰苯二甲酸酯，然后 使用高效液相色譜 (HPLC) 對(duì)萃取所得鄰苯二甲酸酯的百分比回收 率進(jìn)行測(cè)定。再通過(guò)計(jì)算得到的回收率對(duì)兩種方法（SLE 和 LLE） 進(jìn)行比較。 在 SLE 中，使用高純度、精確稱量的惰性硅藻土吸附劑有助于將 分析物從水溶液中萃取入有機(jī)溶劑內(nèi)。含分析物的水溶液在穿過(guò)萃 取柱時(shí)，水相將吸附到硅藻土上。待溶液吸附到吸附劑上之后，使 用不可混溶的有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，分析物從萃取柱上被洗脫 [7]。 由于水溶液在吸附劑中形成的分散層非常薄，兩種溶劑會(huì)緊密接 觸，因此不必振蕩即可將分析物萃取入有機(jī)溶劑中，而在 LLE 萃 取過(guò)程中必須進(jìn)行振蕩。這樣有助于避免出現(xiàn) LLE 中常見的乳化 現(xiàn)象。SLE 萃取柱的外層通常與有相分離濾芯結(jié)合以防止發(fā)生混 合，如果發(fā)生混合，將會(huì)導(dǎo)致水相與有機(jī)溶劑一起被洗脫下來(lái)。 Chem Elut SLE 具有多種可選規(guī)格，可購(gòu)買預(yù)填充的萃取柱，也 可散裝購(gòu)買。

實(shí)驗(yàn)部分 所有有機(jī)溶劑均為 HPLC 級(jí)純度。乙腈購(gòu)自 Burdick and Jackson (Muskegan, MI)。甲醇購(gòu)自 Fisher Scientific (Fairlawn, NJ)。丙 酮和乙酸乙酯購(gòu)自 Pharmco (Brookfield, CT)。超純水由 Millipore Synergy UV 純化系統(tǒng)制得。鄰苯二甲酸二乙酯、鄰苯二甲酸二丙 酯、鄰苯二甲酸丁芐酯和鄰苯二甲酸二環(huán)己酯購(gòu)自 Sigma-Aldrich Corp。采用甲醇配制成含四種鄰苯二甲酸酯的儲(chǔ)備液。儲(chǔ)備液中 各種鄰苯二甲酸酯的濃度為大約 10 mg/mL。采用甲醇對(duì)儲(chǔ)備液 進(jìn)行稀釋，得到用于創(chuàng)建校準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)溶液。配制得到的標(biāo)準(zhǔn) 溶液的標(biāo)示濃度分別為 10、25、50、100、500 和 1000 µg/mL。 萃取過(guò)程 向沐浴露中加入鄰苯二甲酸酯儲(chǔ)備液，然后用 SLE 和 LLE 進(jìn)行處 理，測(cè)定每種鄰苯二甲酸酯的百分比回收率。SLE、LLE 和 HPLC 方法采用已出版的用于測(cè)定蜂蜜中農(nóng)藥殘留物 [8,9] 和測(cè)定沐浴露 中對(duì)羥基苯甲酸酯 [10] 的方法。采用 SLE 或 LLE 進(jìn)行萃取之前， 首先按照?qǐng)D 1 所述的步驟制備樣品。然后將制得的樣品全部倒入 SLE 萃取柱中（對(duì)于 SLE）或分液漏斗中（對(duì)于 LLE）。按照?qǐng)D 1 所 述的步驟制得 24 個(gè)獨(dú)立樣品。將這些樣品分為兩組，每組 12 個(gè)。 其中 12 個(gè)樣品加入 200 µg/mL 的鄰苯二甲酸酯，另外 12 個(gè)樣品 加入 20 µg/mL 的鄰苯二甲酸酯，計(jì)算高濃度和低濃度鄰苯二甲 酸酯的回收率。按照?qǐng)D 2 所述的步驟使用 SLE 方法萃取 6 個(gè)高濃 度加標(biāo)樣品和 6 個(gè)低濃度加標(biāo)樣品。其余的 12 個(gè)樣品按照?qǐng)D 3 所 述的步驟采用 LLE 方法進(jìn)行萃取。這樣即可對(duì)兩種方法進(jìn)行直接 比較。采用的 SLE 萃取柱為 Chem Elut，5 mL 無(wú)緩沖柱。

結(jié)論 本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)顯示了利用 Agilent Chem Elut SLE 萃取柱從洗發(fā)水/ 沐浴露基質(zhì)中萃取鄰苯二甲酸酯的有效方法。使用 SLE 方法時(shí)， 與鄰苯二甲酸酯一起從基質(zhì)中萃取出的干擾物最少。相比之下， 使用 LLE 方法萃取得到的干擾物會(huì)影響分析物的準(zhǔn)確定量分析。采 用 SLE 所得萃取液的色譜圖比采用 LLE 所得的色譜圖更加清晰， 使用 SLE 得到的結(jié)果整體優(yōu)于 LLE 得到的結(jié)果。