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一抗選擇的好壞對免疫組化實驗的至關(guān)重要，一抗盡量選擇單克隆抗體，還要注意其抗體來源（兔抗、鼠抗或者其他）要與二抗匹配。一抗的選擇要點和技巧
1、單克隆和多克隆抗體的選擇
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合，就像導dan精確地命中目標一樣。另一方面，即使是同一個抗原決定簇，在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中，一般單克隆抗體特異性強，但親和力相對小，檢測抗原靈敏度相對就低；而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強，靈敏度高，但易出現(xiàn)非特異性染色（可以通過封閉等避免）。
2、種屬來源
一般兔來源的多是多克??；而小鼠來源的多是單克隆，但也有另外。根據(jù)此來源來選擇相應的二抗。
3、種屬反應性的選擇
這一點很重要，表明這種抗體可能存在種屬差異，且這種抗體適合檢測哪種種屬動物體內(nèi)的抗原。
4、應用范圍的選擇
有的一抗只能用于 WB ( Western blotting）或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等；甚至表明石蠟切片或冰凍切片。
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