在上期內(nèi)容中，我們重點(diǎn)為大家介紹并推薦了適用于中草藥檢測(cè)的各類安捷倫色譜柱，以便大家在日后的檢測(cè)工作中匹配使用。本期繼續(xù)帶來(lái)適用于車前子配方顆粒檢測(cè)的色譜柱推薦，跟上我們，精彩繼續(xù)！

本實(shí)驗(yàn)選用的色譜柱 InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 采用 Agilent 專有的表面多孔型填料技術(shù), 其 2.7 μm 色譜柱的分離速度和分離度能媲美亞二微米全多孔類型的色譜柱，但柱壓僅有其一半。同時(shí)柱頭采用較大的 2 μm 篩板能耐受更“臟”的樣品，有利于提高色譜柱的耐受性。特征譜圖采用的 Poroshell 120 EC-C18(2.1x100mm, 2.7μm) 色譜柱，測(cè)試結(jié)果*符合標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。

根據(jù)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局 《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)》中車前子配方顆粒的檢測(cè)項(xiàng)目，對(duì)其特征譜圖和含量測(cè)定都采用超高效液相色譜法。特征譜圖測(cè)定中要求理論板數(shù)按京尼平苷酸峰計(jì)算應(yīng)不低 3000，供試品呈現(xiàn)的特征峰保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品相對(duì)應(yīng)。含量測(cè)定中規(guī)定了理論板數(shù)按京尼平苷酸峰計(jì)算應(yīng)不低于 3000。本文采用 Infinity 1290 超高效液相色譜儀以及 InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2.1x100mm, 2.7μm 色譜柱對(duì)車前子配方顆粒的特征譜圖進(jìn)行了分析，并對(duì)車前子配方顆粒中京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量進(jìn)行了測(cè)定。此外，我們也對(duì)該方法進(jìn)行了加速，能夠?qū)崿F(xiàn)更快速的分析。

1、 特征譜圖

色譜條件：  

標(biāo)準(zhǔn)方法：  

流動(dòng)相：A：CH3OH；B：0.3%醋酸水  

梯度：0-0.2min，95%B；0.2-8min，95%B-40%B；8-10min，40-95%B；10-15min，95%B  

流速：0.3ml/min  

柱溫：30°C  

檢測(cè)波長(zhǎng)：245nm(4nm),Ref:off;采樣頻率：20Hz  

進(jìn)樣量：2μL  

加速方法：  

梯度：0-0.1min，95%B；0.1-4min，95%B-40%B；4-5min，40-95%B；5-7.5min，95%B  

流速：0.6ml/min  

其余同上。

結(jié)果

1）使用Poroshell色譜柱，能準(zhǔn)確定位供試品中的4個(gè)特征峰；供試品色譜圖中，未出現(xiàn)與車前子苷對(duì)照品參照物峰保留時(shí)間一致的色譜峰。

2）標(biāo)準(zhǔn)方法和加速方法的理論板數(shù)按京尼平苷酸峰計(jì)算分別為 38475 和 37988，大于規(guī)定值 3000，結(jié)果符合要求。

3） 使用加速方法加速分析后，分析時(shí)間縮短 7.5 分鐘(50% 時(shí)間節(jié)省)。

2、 含量測(cè)定

色譜條件：

標(biāo)準(zhǔn)方法：  

流動(dòng)相：A：CH3OH；B：0.5%醋酸水  

梯度：0-0.2min，95%B；0.2-10min，95%B-40%B；10-10.1min，40-95%B；10.1-15min，95%B  

流速：0.3ml/min  

柱溫：30°C  

檢測(cè)波長(zhǎng)：245nm(4nm),Ref:off;采樣頻率：20Hz  

進(jìn)樣量：2μL  

加速方法：  

梯度：0-0.1min，95%B；0.1-5min，95%B-40%B；5-5.05min，40-95%B；5.05-7.5min，95%B  

流速：0.6ml/min  

其余同上。

結(jié)果

1）使用該方法測(cè)定京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量，京尼平苷酸的理論板數(shù)符合標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定。

2）通過(guò)提高一倍流速，可加速分析方法，分析時(shí)間縮短至 7.5 min(50%時(shí)間節(jié)省)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)選用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 色譜柱對(duì)車前子配方顆粒特征譜圖及含量進(jìn)行了檢測(cè)，均符合標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)系統(tǒng)適用性的要求。本方法可用于車前子配方顆粒的分離和檢測(cè)，為該配方顆粒的質(zhì)量保證提供檢測(cè)依據(jù)。

儀器系統(tǒng)及色譜柱推薦