ROC液相分析柱共有三種基本類(lèi)型:液-液,液-固和離子交換。液-液色譜柱不那么受歡迎,因?yàn)樗鼈兊姆€(wěn)定性有限且不方便。在液-固色譜柱中,固定相為固體,分析物吸收到固定相上,從而分析混合物的成分。通常,HPLC在分析柱之前有一個(gè)保護(hù)柱,以保護(hù)并延長(zhǎng)分析柱的使用壽命。保護(hù)柱的作用是去除色譜柱上不可逆的顆粒物、污染物和分子等。
ROC液相分析柱是色譜分析過(guò)程中重要的部分,相當(dāng)于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數(shù)將會(huì)造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。
即使是液相色譜柱也分很多類(lèi)型,比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素,才能結(jié)合目標(biāo)分析物的性質(zhì)、需要達(dá)到的分析效果及實(shí)驗(yàn)室條件來(lái)選擇適合的色譜柱。
液相色譜分析中,色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開(kāi)發(fā)所需的時(shí)間,并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場(chǎng)上色譜柱種類(lèi)繁多,不同類(lèi)型的色譜柱分離對(duì)象不同,因此,要做合適的選擇,要對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。
在設(shè)定選擇樣品分析的HPLC方法時(shí),首先需要根據(jù)化合物的分子量大小,極性大小等因素選擇合適的分離模式,在適當(dāng)?shù)姆蛛x模式下去選擇合適的色譜柱及流動(dòng)相。在很多色譜分析中涉及的化合物樣品絕大部分都可以使用反相分離模式。
硅膠純度對(duì)峰形有很大液相,硅膠雜質(zhì)和殘留的金屬離子會(huì)影響樣品的峰形,如果硅膠表面的金屬含量高會(huì)影響堿性化合物的峰形,易發(fā)生拖尾。
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