蛋白層析純化系統(tǒng)選擇和使用的一些說明

來源：上海閃譜生物科技有限公司 2022年07月25日 16:03

　　蛋白層析純化系統(tǒng)集凝膠過濾、分配層析和吸附層析于一體，適合于親脂性小分子化合物的純化，能將結構性能非常相近的有機物進行分離，尤其適合中草藥中具有生理活性有效成分的分離。

　　蛋白層析純化系統(tǒng)的選擇及使用：

　　針對實驗室級別的蛋白純化層析系統(tǒng)進行介紹，蛋白純化層析系統(tǒng)為模板，對蛋白純化層析系統(tǒng)的硬件及軟件部分，例如系統(tǒng)泵、buffer選擇閥、收集系統(tǒng)、檢測器、柱前柱后壓等如何選擇及工作原理進行詳細的講解。

　　1、蛋白純化層析系統(tǒng)與HPLC的區(qū)別。

　　2、硬件各部分的選擇。

　　3、定量環(huán)、定量杯的安裝及使用，定量環(huán)、定量杯、系統(tǒng)泵、樣品泵上樣的優(yōu)點。

　　4、系統(tǒng)中壓力產(chǎn)生的原因，如何保護層析柱。

　　5、延遲體積對峰型及收集的影響。

　　蛋白層析純化系統(tǒng)的操作步驟：

　　1.打開電腦，進入AKTA系統(tǒng)。

　　2.打開AKTA電源，連接系統(tǒng)。

　　3進入UniCorn系統(tǒng)。

　　4.用水洗A泵。

　　5.設置層析柱的壓力上限及適當?shù)牧魉佟?/div>

　　6.將Superdex200TM層析柱或Superdex75TM層析柱與FPLC連接。

　　7.用至少1個柱體積的水沖洗層析柱。

　　8.用至少1個柱體積的緩沖溶液平衡層析柱。

　　9.將準備好的樣品于4℃，12000rpm離心10-20min。

　　10.在Load狀態(tài)下通過上樣環(huán)上樣。

　　11.在Inject狀態(tài)下樣品進入系統(tǒng)，并在2mL時調(diào)回Load狀態(tài)。

　　緩沖液（流動相）和樣品流過柱子，分子進入不同的材料孔中。小一些的分子移動的距離更。

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