手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
CRISPR Cas9酶是原核生物的一種天然免疫系統(tǒng)。某些細(xì)菌在遭到病毒入侵后，能夠把病毒基因的一小段存儲到自身的 DNA 里一個稱為 CRISPR 的存儲空間。當(dāng)再次遇到病毒入侵時，細(xì)菌能夠根據(jù)存寫的片段識別病毒，將病毒的DNA切斷而使之失效。分布在40%的已測序細(xì)菌和90%的已測序古細(xì)菌當(dāng)中。 (注：生活在深海的火山口、陸地的熱泉以及鹽堿湖等環(huán)境中，有一些結(jié)構(gòu)的細(xì)菌，稱為古細(xì)菌)
CRISPR Cas9酶的作用原理：
階段一：CRISPR 的高度可變的間隔區(qū)的獲得(俘獲外源DNA，登記“黑名單”)
CRISPR 的高度可變的間隔區(qū)獲得，其實(shí)就是指外來入侵的噬菌體或是質(zhì)粒DNA 的一小段DNA 序列被整合到宿主菌的基因組，整合的位置位于CRRSPR 的5' 端的兩個重復(fù)序列之間。因此，CRISPR 基因座中的間隔序列從5' 到3' 的排列也記錄了外源遺傳物質(zhì)入侵的時間順序。
階段二：CRIPSR 基因座的表達(dá)(包括轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后的成熟加工)
CRISPR序列在前導(dǎo)區(qū)的調(diào)控下轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生pre-crRNA(crRNA的前體)，同時與pre-crRNA序列互補(bǔ)的tracrRNA(反式激活crRNA)也被轉(zhuǎn)錄出來。pre-crRNA通過堿基互補(bǔ)配對與tracrRNA形成雙鏈RNA并與Cas9編碼的蛋白組裝成一個復(fù)合體。它將根據(jù)入侵者的類型，選取對應(yīng)的“號碼”(間隔序列RNA)，并在核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ)的協(xié)助下對這段進(jìn)行剪切，形成一段短小的crRNA(包含單一種類的間隔序列RNA以及部分重復(fù)序列區(qū))。
階段三：CRISPR/Cas 系統(tǒng)活性的發(fā)揮(靶向干擾)
crRNA，Cas9以及tracrRNA組成復(fù)合物可以對入侵者的DNA進(jìn)行準(zhǔn)確的打擊。這個復(fù)合物將掃描整個外源DNA序列，并識別出與crRNA互補(bǔ)的原間隔序列。這時，復(fù)合物將定位到PAM/原間隔序列的區(qū)域，DNA雙鏈將被解開，形成R-Loop。crRNA將與互補(bǔ)鏈雜交，而另一條鏈則保持游離狀態(tài)。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心