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固體培養(yǎng)基的分類與原理

來(lái)源:浙江聯(lián)碩生物科技有限公司   2022年07月28日 09:14  

在一般培養(yǎng)溫度下呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基都稱固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入1.5%~2.0%左右的瓊脂,加熱至100℃溶解,40℃下冷卻并凝固,使其成為固體狀態(tài)即為固體培養(yǎng)基。

分類

固體培養(yǎng)基可以分為兩類:一類是用天然的固體狀物質(zhì)制成的,如用馬鈴薯塊、麩皮、米糠、豆餅粉、花生餅粉制成的培養(yǎng)基,酒精廠、釀造廠等常用這種培養(yǎng)基;另一類是在液體中添加凝固劑而制成的,如實(shí)驗(yàn)室中常用的瓊脂固體斜面和固體平板培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基廣泛用于微生物的分離、鑒定、保藏、計(jì)數(shù)及菌落特征的觀察等。

原理

固體培養(yǎng)基的凝固劑一般不是微生物的營(yíng)養(yǎng)成分,只起固化作用。理想的凝固劑應(yīng)具備以下條件:不會(huì)被微生物分解利用;不會(huì)因高溫滅菌而受到破壞;在微生物生長(zhǎng)的溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài);對(duì)微生物及操作人員均無(wú)毒害作用;透明度好、凝固力強(qiáng);價(jià)格低廉,配制方便。常用的凝固劑是瓊脂。瓊脂的主要成分是硫酸半乳聚糖,絕大多數(shù)微生物都不能分解利用它。瓊脂的熔點(diǎn)為96℃,凝固點(diǎn)為40℃,因此,在一般的培養(yǎng)條件下都呈固體狀態(tài),而且透明度強(qiáng)。正是這些優(yōu)良特性,使瓊脂取代了早期使用的明膠而成為常用的凝固劑。

呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基,叫液體培養(yǎng)基或培養(yǎng)液,發(fā)酵液。液體培養(yǎng)基因營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分布均勻,與菌體表面接觸充分,還能大量溶解微生物的代謝產(chǎn)物等優(yōu)點(diǎn),廣泛用于微生物的生理、代謝研究以及大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)中。

半固體培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)液中加入少量的凝固劑(如0.2%-0.5%的瓊脂)而制成的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基常用于觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)、厭氧菌的分離和菌種鑒定等。

理想的凝固劑應(yīng)具備以下條件:①不被所培養(yǎng)的微生物分解利用;②在微生物生長(zhǎng)的溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài),在培養(yǎng)嗜熱細(xì)菌時(shí),由于高溫容易引起培養(yǎng)基液化,通常在培養(yǎng)基中適當(dāng)增加凝固劑來(lái)解決這一問(wèn)題;③凝固劑凝固點(diǎn)溫度不能太低,否則將不利于微生物的生長(zhǎng);④凝固劑對(duì)所培養(yǎng)的微生物無(wú)毒害作用;⑤凝固劑在滅菌過(guò)程中不會(huì)被破壞;⑥透明度好,粘著力強(qiáng);⑦配制方便且價(jià)格低廉。實(shí)驗(yàn)用的凝固劑有瓊脂、明膠和硅膠,后者用于配制自養(yǎng)微生物的固體培養(yǎng)基。對(duì)其他多數(shù)微生物來(lái)講,以瓊脂最是合適,一般加入1.5-2.5%即可凝固成固體。此培養(yǎng)基可供分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、菌種保藏等用。

 

 

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