總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡單,經(jīng)濟有效的方法,可從全血,哺乳動物細(xì)胞,細(xì)菌細(xì)胞和真菌細(xì)胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時使污染物通過柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫,不用酚提取或醇沉淀。
總RNA提取試劑盒使用注意事項如下:
1、如果需要測量RNA的A260/A280的比值,建議使用RNA定量緩沖液對樣品稀釋后,進行測量。
2、所有離心管,槍頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可180°C烘烤4小時以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%DEPC至重蒸水或MiliQ級水中,處理過夜,滅菌即成DEPC水。
3、使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些。因為在細(xì)胞或組織凍融過程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時抽RNA,推薦先加入適量Trizol,并裂解樣品后凍存。
4、必須戴一次性手套操作,且盡量不要對著RNA樣品呼氣或說話,以防RNA酶污染。建議戴一次性口罩操作。
5、Trizol含有毒物質(zhì)苯酚,避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛,請戴防護眼鏡或使用透明保護屏。如皮膚接觸Trizol,請立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,請聽取醫(yī)生意見。
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