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PuroSpher STAR 色譜柱的技術(shù)主要包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)沒有想象中那么簡單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，需要經(jīng)驗(yàn)積累。
一般情況下，正相反相柱應(yīng)該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖，不過目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉，反沖后還是正著用比較好，以免柱子的兩頭都被污染。建議正向使用，反向沖洗。
PuroSpher STAR 色譜柱的使用步驟分為以下四步：
步驟一：預(yù)處理PuroSpher STAR 色譜柱.
在萃取樣品之前,為了濕潤PuroSpher STAR 色譜柱填料,用一滿管溶劑沖洗管子。反相類型硅膠和非極性吸附劑介質(zhì),通常用水溶性有機(jī)溶
劑如甲醇預(yù)處理,然后用水或緩沖溶液。甲醇濕潤吸附劑表面和滲透鍵合烷基相,以允許水更有效地濕潤硅膠表面。有時前預(yù)處理溶劑
使用在甲醇之前。這些溶劑通常是與洗脫溶劑一樣，是用之消除固相萃取管上的雜質(zhì)及其對分析物的干擾,也可能該雜質(zhì)只溶于強(qiáng)洗脫溶劑。
正相類型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常用樣品所在的有機(jī)溶劑來預(yù)處理。離子交換填料將用于非極性有機(jī)溶劑中的樣品,其用3-5ml的去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來預(yù)處理。為了使固相萃取填料從預(yù)處理到樣品加入時都保持濕潤,允許大約1毫升的預(yù)處理溶劑在管過濾片(frit)或萃取片表面之上。如果樣品是從一個貯液管或過濾管引入固相萃取管,則多加入0.5毫升后的預(yù)處理溶劑到1毫升的固相萃取管中,如果是2毫升到3毫升的PuroSpher STAR 色譜柱中,多加入4升到6毫升管中等等。這是為了保證在樣品加入之前PuroSpher STAR 色譜柱濕潤。如果在樣品加入之前,PuroSpher STAR 色譜柱中的填料干了,重復(fù)預(yù)處理過程。在重新引入有機(jī)溶劑之前,用水沖洗柱中緩沖溶液的鹽。
步驟二：加入樣品.
將樣品裝入PuroSpher STAR 色譜柱，此時，固相萃取小柱中的填料會吸附樣品中所感興趣的化合物或者樣品中的雜質(zhì)。這樣，當(dāng)樣品流出時，所選擇的化合物（包括雜質(zhì)）被留在PuroSpher STAR 色譜柱上。
步驟三：沖洗填料.
用一種強(qiáng)得能洗脫雜質(zhì)而又弱得能保留感興趣的化合物的沖洗液來沖洗雜質(zhì)。
步驟四：洗脫感興趣的化合物。
用溶劑將被吸附在PuroSpher STAR 色譜柱上的化合物洗脫在溶液里。
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