真菌毒素為真菌增殖時產生的次生有毒代謝產物。
真菌的孢子能透過空氣、風力、水流和動物等方式來傳播。只要有少量蛋白質、淀粉、脂質及水份,就是適合真菌生長的環(huán)境,因此谷物、果實類、玉米及花生都是真菌主要生長處。
黃曲毒素具有潛在性的肝毒害(hepatoxin)及致癌性,其性質穩(wěn)定,因此真菌毒素易出現(xiàn)在食物鏈中;除了直接食用被真菌毒素污染的食物,也可能透過飼料讓動物生病。
真菌毒素污染食品和飼料對于全球性作物及動物養(yǎng)殖業(yè)影響很大。
據估計每年約25%農作物受到不同程度的真菌毒素污染,以美國和加拿大而言,真菌毒素造成飼料業(yè)和家畜業(yè)每年損失約50億美金(IFST, 2006)。
本篇應用以FaTEx-gen快速凈化萃取凈化柱進行前處理,使用LC-MS/MS分析11種真菌毒素的含量, 包含黃曲毒素類、赭曲毒素A及鐮孢菌毒素類(伏馬毒素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素)、玉米赤霉毒素等),建立一套快速準確的檢測方法,利于維護飼料質量及相關作物食品安全。
搭配ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱及Agilent 6470液相層析串聯(lián)式質譜儀,檢測谷物、黃豆及花生等基質。
樣品制備流程如下:
樣品秤樣后加標靜置,加入12mL萃取溶液,高速震蕩機震蕩30分鐘,于3500rpm離心5分鐘,得到上清液。
取一定量的上清液通過FaTEx-gen SPE柱凈化,氮吹回溶后上機到LC-MSMS分析。
分析結果如表三所示,回收率落在81.9~112.7%范圍內,CV%皆小于20,顯示此為一快速、穩(wěn)定之檢驗方法。
前處理步驟和儀器分析條件,歡迎索取。
產品信息:FaTEx-gen 真菌毒素專用SPE柱 巨研科技 50只/盒
表2、霉菌毒素11項藥劑之添加濃度
分析物 | 中文名稱 | 添加濃度(ng/g) |
Aflatoxin B1 | 黃曲霉素 B1 | 2.5 |
Aflatoxin B2 | 黃曲霉素 B2 | 2.5 |
Aflatoxin G1 | 黃曲霉素 G1 | 2.5 |
Aflatoxin G2 | 黃曲霉素 G2 | 2.5 |
Ochratoxin A | 赭曲霉毒素 A | 2.5 |
T-2 toxin | T-2毒素 | 5 |
HT-2 toxin | HT-2毒素 | 5 |
Deoxynivalenol | 嘔吐毒素 | 25 |
Zearalenone | 玉米赤霉烯酮 | 25 |
Fumonisin B1 | 伏馬毒素 B1 | 100 |
Fumonisin B2 | 伏馬毒素 B2 | 100 |
表3、谷類樣品中11項霉菌毒素之回收率和變異系數(shù)
中文名稱 | 英文名稱 | 黃豆 | 花生 | ||
CV% | R% | CV% | R% | ||
黃曲霉素 B1 | Aflatoxin B1 | 2.3 | 108.5 | 9.0 | 97.5 |
黃曲霉素 B2 | Aflatoxin B2 | 3.7 | 105.0 | 2.4 | 98.2 |
黃曲霉素 G1 | Aflatoxin G1 | 2.6 | 105.4 | 2.0 | 102.9 |
黃曲霉素 G2 | Aflatoxin G2 | 3.4 | 107.4 | 4.0 | 103.0 |
赭曲霉毒素 A | Deoxynivalenol | 4.8 | 100.3 | 1.6 | 103.9 |
T-2毒素 | Fumonisin B1 | 8.1 | 90.3 | 6.1 | 89.0 |
HT-2毒素 | Fumonisin B2 | 13.5 | 81.9 | 5.3 | 96.7 |
嘔吐毒素 | HT-2 toxin | 9.1 | 109.7 | 13.4 | 100.4 |
玉米赤霉烯酮 | Ochratoxin A | 2.8 | 101.9 | 3.8 | 106.0 |
伏馬毒素 B1 | T-2 toxin | 5.9 | 110.1 | 5.6 | 112.7 |
伏馬毒素 B2 | Zearalenone | 8.1 | 108.6 | 5.0 | 94.4 |
*重復性,n=3
結論:
1、本篇以FaTEx-gen萃取凈化套組搭配ZORBAX Eclipse Plus C18管柱于液相串聯(lián)質譜之分析方法,檢測谷類樣品(黃豆及花生)之多重霉菌毒素(黃曲毒素類、赭曲毒素A及鐮孢菌毒素類)共11項,每次分析時間13分鐘,為快速準確的檢驗方法。
2、 FaTEx-gen萃取凈化套組可針對復雜檢體基質加強凈化,降低基質干擾。
3、 以FaTEx-gen套組檢測添加多重毒素標準品之谷類樣品(添加濃度:黃曲霉素B1 Aflatoxin B1,黃曲霉素B2 Aflatoxin B2, 黃曲霉素G1 Aflatoxin G1, 黃曲霉素G2 Aflatoxin G2,赭曲霉毒素 A Ochratoxin A:2.5 ng/g,T-2 toxin, HT-2 toxin:5 ng/g;嘔吐毒素Deoxynivalenol, 玉米赤霉烯酮 Zearalenone:25 ng/g;伏馬毒素 B1 Fumonisin B1,伏馬毒素 B2 Fumonisin B2:100 ng/g)回收率落在81.9~112.7%范圍內,變異系數(shù)皆小于20,為穩(wěn)定之檢驗方法。
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