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鱟試驗(yàn)法中有關(guān)內(nèi)毒素與熱原及內(nèi)毒素抑制因子的問題

來源:科德角國際生物醫(yī)學(xué)科技(北京)有限公司   2022年08月30日 14:01  

一、內(nèi)毒素與熱原的關(guān)系問題

 

目前很多文獻(xiàn)中,熱原與內(nèi)毒素為同義詞,經(jīng)?;ビ谩5⒉皇撬械膬?nèi)毒素均有很強(qiáng)的致熱性,因?yàn)橐呀?jīng)證明某些天然的內(nèi)毒素致熱性較弱、需要較大的劑量(如2μg/kg)時(shí)才能引起發(fā)熱。反之,亦并不是所有的能引起發(fā)熱的物質(zhì)均為內(nèi)毒素。許多化學(xué)物質(zhì),特別是中樞作用藥如利-血-平、丙咪嗪、5-羥色胺、胍乙啶在一定條件下亦能致熱。各種微生物及其產(chǎn)物、免疫復(fù)合物及激素等均可引起發(fā)熱。而這些發(fā)熱物質(zhì)易被熱力破壞,故大輸液和藥品、器械在工業(yè)生產(chǎn)過程中容易防止污染而被清除,僅有內(nèi)毒素難以清除,易造成危害。

 

 

二、內(nèi)毒素抑制因子問題

 

內(nèi)毒素抑制因子又稱內(nèi)毒素抑制物質(zhì)、主要存在于血漿中。血漿中內(nèi)毒素抑制因子很多,因此內(nèi)毒素抑制因子并非僅為一種單一的成分,而是由好幾種(甚至數(shù)十種〉物質(zhì)組成。內(nèi)毒素抑制因子與內(nèi)毒素的作用為一種可逆的反應(yīng),并不破壞內(nèi)毒素,當(dāng)采取各種方法除去或破壞這些抑制因子后,內(nèi)毒素的活性可以*恢復(fù)。

 

目前對(duì)內(nèi)毒素抑制因子的本質(zhì)尚未*搞清,一般認(rèn)為可能有以下幾類:

 

1.蛋白酶類

 

有人發(fā)現(xiàn)血清中的兩種α2球蛋白對(duì)內(nèi)毒素有抑制作用。在Ca++存在下,一種耐熱的血清酯酶有抗內(nèi)毒素的作用,另一種不耐熱的α-球蛋白可使LPS碎片去毒性。日本學(xué)者小林正義從血清中分離到稱為E1E3的內(nèi)毒素抑制因子,根據(jù)其分子量、碳水化-物含量、氨基酸成分,以及應(yīng)用免疫擴(kuò)散及免疫電泳技術(shù)證明E1α1 -抗胰-蛋-白-酶α1 -AT,E3即抗凝-血-酶(A t-)。繼而,用純化的α1 -ATAt-Ⅲ亦證實(shí)其有抑制LT反應(yīng)的作用。其中的α1 -AT的抑制作用強(qiáng),At一Ⅲ的抑制作用較弱。但后者在肝素存在時(shí),抑制作用可增強(qiáng)。

 

2.菌體抗體

 

亦稱O抗體,為內(nèi)毒素O抗原刺激機(jī)體而產(chǎn)生的。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明,抗體對(duì)LT(鱟試驗(yàn)法,Limulus test)反應(yīng)有抑制作用,抑制機(jī)理可能為與內(nèi)毒素的O抗原結(jié)合。O抗體的抑制作用是有型特異性的,與補(bǔ)體無關(guān)。其它如膽汁酸鹽、藥物EDTA,肝素、多-粘-菌-素-B對(duì)LT反應(yīng)亦有抑制作用。

 

常用除去血漿抑制因子方法的除去能力如表3所示。

 

 

從表3的結(jié)果可以看出,上述幾種方法均不能*去除血漿中的抑制因子。今后宜加強(qiáng)這方面的研究。

 


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