該細胞從一名1歲的患有急性單核細胞性白血病的男孩的外周血中分離建立。該細胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細胞,細胞膜和胞漿內(nèi)均沒有免疫球蛋白,表達C3R和FcR;可受佛波酯TPA誘導(dǎo)向單核系方向分化;可作為轉(zhuǎn)染宿主。
? 補液法:培養(yǎng)基變黃時可補加適量(1~2mL)新鮮培養(yǎng)基,補加1-2次之后,用離心的方式全部換液,離心1200rpm (約250g)3分鐘。

? 如果換液后第二天培養(yǎng)基就變得很黃,同時鏡下檢查未污染,說明細胞密度大,應(yīng)該傳代。
? 搖晃培養(yǎng)瓶,把細胞搖勻,均分到兩個瓶子里,每瓶再補充等量培養(yǎng)基。
THP-1細胞復(fù)蘇后通常需要3-5天恢復(fù)狀態(tài),建議復(fù)蘇后48小時內(nèi)不要進行操作。
THP-1培養(yǎng)常見問題及解決方法
? 培養(yǎng)基里一定要加β-巰基乙醇( β-mercaptoethanol)嗎?
β-巰基乙醇是一種常用的培養(yǎng)補充劑,有抗氧化的作用,可減少氧化應(yīng)激對THP-1細胞的影響。當(dāng)細胞密度過大但需要維持時,可適當(dāng)增加巰基乙醇的比例(不超過標(biāo)準(zhǔn)量的1.5倍)。
? 懸浮細胞在鏡下觀察時,難以聚焦或估算密度怎么辦?
懸浮細胞會隨著液體流動,不容易聚焦,靜置5-10分鐘使細胞沉底,之后再輕輕放上顯微鏡觀察,將有助于聚焦和估算細胞密度。
? THP-1細胞在培養(yǎng)過程中細胞發(fā)生聚團怎么辦?
少量細胞聚團,呈葡萄串狀,屬于正常現(xiàn)象,特別是細胞密度較低時,易出現(xiàn)這種情況。更換血清品牌或增大血清比例(不超過20%)有助于解決聚團問題。不建議將聚團的細胞吹散,等待密度高時,會自己分散開。
? THP-1細胞在培養(yǎng)過程中細胞發(fā)生貼壁怎么辦?
少量細胞貼壁屬于正常情況,將細胞懸液轉(zhuǎn)移至新瓶中即可。當(dāng)貼壁細胞的比例高于20%,說明細胞生長環(huán)境有異常,需排查培養(yǎng)箱設(shè)置、培養(yǎng)基成分,以及培養(yǎng)器皿是否異常。
[THP-1細胞在密度較高時不聚團]
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