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高鐵血紅蛋白還原檢測試劑盒(比色法)說明書

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2022年09月13日 11:37  

產(chǎn)品簡介:

紅細胞酶缺陷的檢查可通過高鐵血紅蛋白還原實驗、抗壞血酸、Heinz 小體等檢測,  高鐵血紅蛋白還原檢測試劑盒采用 Schumm 法,其檢測原理是在有足夠的NADPH 存在下,高鐵血紅蛋白能被高鐵血紅蛋白還原酶還原成亞鐵血紅蛋白,當紅細胞內(nèi)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶含量正常時,由磷酸戊糖代謝途徑生成的 NADPH 的數(shù)量足以完成上述還原反應當紅細胞內(nèi) G6PD 含量不足或缺乏時,高鐵血紅蛋白還原速度減慢,甚至不能還原,高鐵血紅蛋白呈褐色,用分光光度計在 635nm 波長處檢測。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。


產(chǎn)品組成:

      

名稱

規(guī)格

50T

Storage

試劑(A): 抗凝劑

5ml

4℃

試劑(B): Hb Assay Buffer

1.5ml

4℃

試劑(C): Hb 顯色液

1.5ml

4℃ 避 光

試劑(D): G6PD Buffer

100ml

4℃

使用說明書

1 份

自備材料:

1、離心管或試管

2、水浴鍋或恒溫箱

3、比色杯

4、分光光度計

 

操作步驟(僅供參考)

1、取新鮮靜脈血 0.9ml,加入抗凝劑 0.1ml,充分混勻。

2、低速離心 15min,取出,調(diào)整血細胞與血漿比例為 1:1 后再混勻。

3、取上述抗凝血 0.5ml,加入 Hb Assay Buffer 和 Hb 顯色液各 0.025ml,顛倒混勻 15 次,使與氧氣充分接觸,加塞或密封后放置于 37℃水浴鍋或恒溫箱中孵育 3h。混勻, 取上述血液 0.02ml 加入 G6PD Buffer 2ml。

上述操作,可見下表:

     

加入物(ml)

空白管

測定管

抗凝血

0.5

0.5

Hb Assay Buffer

0.025

Hb 顯色液

0.025

0.025

混勻,放置于 37℃水浴鍋或恒溫箱中孵育 3h。

取上述反應液

0.02

0.02

G6PD Buffer

2

2

4、混勻,室溫放置 2min,比色杯光徑 1cm,用分光光度計 635nm 處測定空白管和測定管吸光度,分別命名為 SA  B。

5、向空白管加入 Hb Assay Buffer 0.025ml,混勻,室溫放置 5min,再次用分光光度計

635nm 處測定空白管吸光度命名為 ST。

 

計算:高鐵血紅蛋白還原率(%)={1-(SA-B)/(ST-B)}×100% 參考區(qū)間:一般應超過 75% 

注意事項:

1、 紅細胞比容低于 30%時,高鐵血紅蛋白還原率顯著下降,需調(diào)整紅細胞與血漿的比例。

2、 樣本不應有凝血或溶血,以免影響測定。

3、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

 

有效期:6 個月有效。


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