酸性染色液的原理:
某些微生物的細胞中含有長鏈脂肪酸而具有了抵抗結(jié)晶紫和其他堿性染色劑透過的保護衣。必須加熱或者使用洗滌劑,以確保初染試劑能滲入微生物內(nèi)。一旦染色試劑進入細胞內(nèi),就不能被通常所用的酸性乙醇溶劑脫色,而呈現(xiàn)粉紅色。
酸性染色液的使用說明:
1、將涂片加熱固定,滴加染色液,徐徐加熱至蒸氣出現(xiàn),但切不可使沸騰。染色如因蒸發(fā)減少時,應(yīng)隨時添加。染5分鐘,傾去剩余染液,水洗。
2、滴加3%鹽酸-乙醇溶液脫色,直至無紅色脫落為止,水洗。
3、滴加呂氏堿性美藍溶液復(fù)染30秒~1分鐘,水洗,待干鏡檢。
酸性染色液的注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
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?、郯凑照f明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
?、菹礈烀笜税鍟r應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
?、奘褂靡淮涡缘奈^以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
?、邔嶒炛胁挥玫陌鍡l應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
?、岵挥玫钠渌噭?yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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