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生物學(xué)實驗之線粒體組學(xué)－線粒體膜電位檢測技術(shù)服務(wù)的實驗原理
技術(shù)原理
JC-1 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi)，可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi)，JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產(chǎn)生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不僅可用于定性檢測，因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測，因線粒體的去化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。
實驗方法
Step1：細胞培養(yǎng)
Step2：轉(zhuǎn)染或藥物處理
Step3：細胞收集
Step4：加 JC-1 試劑
Step5：上機檢測
案例展示
流式檢測線粒體膜電位
實驗周期及交付標準
1. 實驗周期：2-3周
2. 交付標準：流式檢測圖、比值、原始數(shù)據(jù)、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器）
需確認的信息
1. 樣本的種屬及類型（組織還是細胞）
2. 樣本數(shù)量
3. 是否提供探針
4. 拍照要求、分析要求
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