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細(xì)胞凍存時(shí),培養(yǎng)基、血清、DMSO按什么比例配制?

來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司   2022年09月21日 12:00  

DMSO是目前最/常用的細(xì)胞凍存保護(hù)劑,一般使用時(shí)終濃度控制在5~10%,最佳濃度取決于細(xì)胞類(lèi)型。

一般來(lái)說(shuō),存活率比較高的細(xì)胞系,培養(yǎng)基、血清、DMSO按照7:2:1的比例新鮮配制使用。

細(xì)胞計(jì)數(shù)后,用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,至5×10^6 ~ 1×10^7 cells/mL,然后1~1.5mL/管分裝凍存。

對(duì)于存活率較低的細(xì)胞系,或者需要長(zhǎng)時(shí)間保存的細(xì)胞系,可以增加凍存液中的血清濃度,血清和DMSO按9:1的比例配制。

另外,還有商品化的無(wú)血清凍存液可以選擇,不需要預(yù)先配制。一般會(huì)含有多種保護(hù)劑成分,適用于特別珍貴的細(xì)胞的保存,例如干細(xì)胞、分離后的免疫細(xì)胞等等。

在生物細(xì)胞學(xué)研究中,有時(shí)需要體外培養(yǎng)和分析癌細(xì)胞。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好的培養(yǎng)基,如Ausbian干細(xì)胞*培養(yǎng)基是在含微量胎牛血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,通過(guò)添加一種人永生化干細(xì)胞系的條件培養(yǎng)基混合組成。使細(xì)胞更健康,客戶(hù)做實(shí)驗(yàn)更加順利。

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①動(dòng)物血清系列:

胎牛血清,特級(jí)新生牛血清,優(yōu)級(jí)新生牛血清,標(biāo)準(zhǔn)新生牛血清,標(biāo)準(zhǔn)馬血清,特級(jí)馬血清,山羊血清,綿羊血清,兔血清,雞血清,豬血清,大牛血清,小牛血清,狗血清,驢血清,大鼠血清,小鼠血清,豚鼠血清,巴比西鼠血清。

②血漿系列:

胎牛血漿,新生牛血漿,大牛血漿,小牛血漿,兔血漿,馬血漿,山羊血漿,綿羊血漿,雞血漿,豬血漿,狗血漿,驢血漿,大鼠血漿,小鼠血漿,豚鼠血漿。

③脫纖維全血系列(玻璃瓶和Pet塑料瓶):

新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血,兔血,兔紅細(xì)胞(20%),綿羊紅細(xì)胞(20%),雞紅細(xì)胞(20%),兔紅細(xì)胞(4%),綿羊紅細(xì)胞4%,雞紅細(xì)胞(4%)。

④抗凝全血系列:

新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血

⑤裂解全血(脫纖維裂解,抗凝裂解)

脫纖維裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血

抗凝裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血

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