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小鼠雜交瘤細胞株;ss-lgm注意事項

來源:上海研生實業(yè)有限公司   2022年09月28日 11:27  

小鼠雜交瘤細胞株;ss-lgm注意事項:

(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;

(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。

(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。

(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。

(5)關于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

丹參酮IIA-磺酸鈉

丹酚酸A

丹酚酸B

丹酚酸C

丹酚酸D

丹皮酚

膽固醇

膽紅素

膽酸

DL-蛋氨酸(甲硫氨酸)

L-蛋氨酸(甲硫氨酸)

黨參炔苷

α-倒捻子素

β-倒捻子素

地奧司明

地膚子皂苷Ic

地榆皂苷I

地榆皂苷II

碘化木蘭花堿

靛藍

靛玉紅

丁烯基苯酞

丁香酚

丁香酸

丁溴酸東莨菪堿


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