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小鼠雜交瘤細(xì)胞株;ss-lgm注意事項(xiàng)

來(lái)源:上海研生實(shí)業(yè)有限公司   2022年09月28日 11:27  

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;ss-lgm注意事項(xiàng):

(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;

(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。

(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。

(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。

(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

丹參酮IIA-磺酸鈉

丹酚酸A

丹酚酸B

丹酚酸C

丹酚酸D

丹皮酚

膽固醇

膽紅素

膽酸

DL-蛋氨酸(甲硫氨酸)

L-蛋氨酸(甲硫氨酸)

黨參炔苷

α-倒捻子素

β-倒捻子素

地奧司明

地膚子皂苷Ic

地榆皂苷I

地榆皂苷II

碘化木蘭花堿

靛藍(lán)

靛玉紅

丁烯基苯酞

丁香酚

丁香酸

丁溴酸東莨菪堿


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