Raptor核殼分析柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時(shí)間,并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場(chǎng)上色譜柱種類繁多,不同類型的色譜柱分離對(duì)象不同,因此,要做合適的選擇,要對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。
Raptor核殼分析柱的效率與柱半徑平方成反比,內(nèi)徑越小柱效越高,但內(nèi)徑越大,柱容量也增加,允許進(jìn)樣量就越多。當(dāng)進(jìn)樣量超過柱容量時(shí),則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立平衡,將會(huì)導(dǎo)致色譜蜂畸變,柱分辨率降低,重現(xiàn)性不好。
因此對(duì)于復(fù)雜樣品需要準(zhǔn)確分離,要使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就要使用內(nèi)徑大的柱子,目前實(shí)驗(yàn)室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
色譜柱在色譜儀分析系統(tǒng)中起著分離作用,是色譜分析的核心部件。正確使用和維護(hù)色譜柱尤為重要,使用不當(dāng)就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。
溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,以保持色譜柱內(nèi)填料的穩(wěn)定性。
在需要改變檢測(cè)樣品溶液組成是,應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳?。且在使用次洗脫能力?qiáng)的洗脫液沖洗色譜柱時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。
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