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蘇木素伊紅(HE)染色液(水溶)說明書

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2022年09月30日 14:13  

產(chǎn)品簡介:蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱 HE 染色,是病理學(xué)常規(guī)制片中最基本的染色方法,應(yīng)用極其廣泛蘇木精是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結(jié)晶,是一種堿性染色劑,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用,能夠使細胞核染色。在病理診斷、教學(xué)和科研工作中常用 HE 染色對正常組織和病變組織進行形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察,可確定或鑒別病變組織細胞中出現(xiàn)的某些異常物質(zhì)與特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶組織化學(xué)方法、免疫組織化學(xué)方法等也均是在觀察HE 染色組織切片的基礎(chǔ)上進行的HE染色的組織切片中細胞核呈藍色,細胞漿呈紅色,二者形成鮮明的對比,易于觀察分析。

 蘇木素伊紅染色液中蘇木素染色液采用  自主研發(fā)的配方,由進口的高純度蘇木精、氧化劑等組成,不含、甲醇等有害物質(zhì),對細胞核染色效果好,其特點是不易產(chǎn)生沉淀和金屬;應(yīng)用范圍廣,可以用于人、動物、畜牧、水產(chǎn)等領(lǐng)域,可以用于組織石蠟切片、冰凍切片和組織細胞的染色等,蘇木素染色液和伊紅染色液可以重復(fù)使用。

 染色原理:

1、細胞核染色原理:蘇木素為堿性天然染料,可使細胞核著色,細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主    要是 DNA,在 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)中兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使 DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇 木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。

2、細胞漿染色原理:伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色,細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的 pH 值密切相關(guān),當(dāng)染色 pH 值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)    帶正電荷的陽離子結(jié)合,使細胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。

3、分化作用:染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個過程稱為分 化作用,所用的溶液稱為分化液。在 HE 染色中常用 0.5-1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后,必須用鹽 酸乙醇分化,使細胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅    染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。

4、返藍作用:分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),呈藍色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用,另外用自來水(尤其是溫水)浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。


自備材料:

1、二甲苯或浸蠟脫蠟透明液

2、鹽酸乙醇分化液

3、藍化液,如稀氨水、溶液等

4、系列乙醇、自來水或蒸餾水

5、-乙醇混合固定液、4%多聚甲醛

6、中性樹膠

染色結(jié)果:

細胞核呈藍色;細胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維、甲狀腺膠質(zhì)等呈深淺不一的紅色;角蛋白、紅

細胞等呈明亮的橙紅色。

注意事項:

1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈;系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。

2、鹽酸乙醇分化時間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織類別以及新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠,以便*清洗酸。

3、-乙醇混合固定液是由和 95%乙醇等量混合而得,再加入適量乙酸,密閉保存。

4、冷凍切片染色時間盡量要短。

5、藍化液常使用 0.2~1%氨水或 Scott 促藍液或 0.1~1%溶液。

6、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

 

有效期:12 個月有效。




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