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紫外可見分光光度計讀數(shù)不準確應該如何處理

來源:上海杰星生物科技有限公司   2022年10月11日 16:09  

  你在使用過程中,有沒有出現(xiàn)過讀數(shù)不穩(wěn)定的情況呢?相信大部分實驗猿都是遇到過這種現(xiàn)象的,腫么辦?是不是儀器壞了?放輕松,這里給你整理了一些讀數(shù)不穩(wěn)定的原因分享,快來收藏吧!我認為影響紫外分光光度計讀數(shù)不穩(wěn)定的根本原因應該有兩類:一類是能量降低,信噪比下降,這個可能性比較大;另一類是信號接收和處理故障。


 ?。?)先不放比色皿,看儀器是否漂移。如果不漂移,說明儀器正常。


 ?。?)放入蒸餾水比色皿調(diào)零,讀數(shù)漂移到一定數(shù)值后,取出比色皿看一下,內(nèi)壁是否有極細小的氣泡。

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  1、能量降低


 ?。?)比色皿:


  如果是在400nm以下波長測量,需使用石英比色皿,假如使用普通玻璃比色皿會吸收大部分的紫外能量。還有比色皿一般有光面和毛面之分,毛面是手捏的,光面是對正光路的。


 ?。?)樣品架:


  檢查樣品架是否在正確的槽位上,光是否全部照在比色皿上。方法是把波長設(shè)定到550nm左右,這時是比較明亮的黃綠色光,在樣品室內(nèi)用個小紙片擋下就能看到光斑。這個方法也能檢測可見區(qū)的光源是否正常,濾光盤及波長驅(qū)動是否正常。


 ?。?)空白樣品:


  樣品室不放任何東西對空氣調(diào)零,看是否穩(wěn)定。如果穩(wěn)定的話,應該是空白樣品本身吸光度太高了。方法是先對空氣調(diào)零,然后把空白樣品放入光路中看讀數(shù)。如果讀數(shù)很大,例如接近3A,則不可用。


  (4)光源:


  先確認分析波長值,一般紫外可見有2個光源,紫外區(qū)用氘燈,可見區(qū)用鎢燈,切換點一般在340nm。鎢燈光較為明亮刺眼,氘燈光偏青紫色。如果儀器后面有透光窗口可以直接看,如果沒有的話,需要打開外殼,打開燈室罩。光源都是用壽命的,能量變?nèi)趸蚋纱嗖涣亮?,要換燈。也有比較小的可能是光源供電電路故障,例如電源老化后可能導致無法正常點亮氘燈。


  (5)光路:


  看光路是否偏了,可以把波長設(shè)定到550nm左右,觀察樣品室內(nèi)有無黃綠色光線,光斑能否正確照在接收器窗口上。確認燈室內(nèi)光源光斑是否正確照在單色器入狹縫上,確認光路中有無雜物擋住。確認單色器內(nèi)反射鏡、透鏡、光柵、濾光片等是否發(fā)霉或積滿灰塵,這個需要廠家才能處理。


 ?。?)驅(qū)動電路故障:


  例如濾光盤驅(qū)動異常,導致濾光片用錯或者干脆光路被遮擋。一般廠家或?qū)I(yè)人員處理。


  2、信號接收和處理故障


  接收器(例如光電池或者光電倍增管)、放大電路、AD轉(zhuǎn)換電路等都有可能。這類問題一般由廠家或?qū)I(yè)人員處理,這里不詳細說明了。


  紫外可見分光光度計是利用物質(zhì)的分子或離子對某一波長范圍的光吸收作用,對物質(zhì)進行定性分析,定量分析及結(jié)構(gòu)分析,所依據(jù)的光譜是分子或離子吸收入射光中特定波長的光而產(chǎn)生的吸收光譜。


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