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離子色譜檢測滴眼劑中尿囊素含量

來源:賽默飛色譜及質(zhì)譜   2022年10月17日 16:26  

尿囊素是一種無毒、無味、無刺激性、無過敏性的白色晶體,其結(jié)構(gòu)見圖2-9。能溶于熱水、熱醇和稀氫氧化鈉溶液,微溶于常溫的水和醇,其飽和溶液(濃度為 0.6 %)呈微酸性,pH為5.5。在pH值為4-9的水溶液中穩(wěn)定。在非水溶劑和干燥空氣中亦穩(wěn)定;在強(qiáng)堿性溶液中煮沸及日光曝曬下可分解。尿囊素應(yīng)用比較廣泛,在醫(yī)藥方面:尿囊素具有促進(jìn)細(xì)胞生長,加快傷口愈合,軟化角質(zhì)蛋白等生理功能,對骨髓炎、糖尿病、肝硬化、痤瘡均有較好療效。在化妝品方面也廣泛用于雀斑霜、粉刺液、香波、香皂、牙膏、刮臉洗劑、護(hù)發(fā)劑、收斂劑、抗汗除臭洗劑等的添加劑。目前文獻(xiàn)報(bào)道分析尿囊素的方法有HPLC-UV方法,其多采用磷酸緩沖鹽-甲醇/乙腈為流動(dòng)相,用C18反相分析,檢測則以低波長。方法的不足之處在于,尿囊素極性強(qiáng),反相分離峰形很差;尿囊素紫外吸收弱,且低波長檢測樣品容易受到干擾。本方法采用親水液相色譜-CAD檢測器分析使尿囊素克服了上述弱點(diǎn),對于分析尿囊素樣品是一種穩(wěn)定、簡單和高效的方法。測定結(jié)果見圖2-10

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色譜柱:ZIC-pHILIC,5 µm,150×4.6 mm, P/N:1.50461.0001;柱溫:35℃;進(jìn)樣量:1 µL檢測方式:電霧式檢測器(CAD)CoronaUltra;霧化溫度:25 ℃;氣體(N2)壓力:35.0 psi;采集頻率:5 Hz;流動(dòng)相:乙腈-5%乙酸銨(80:20),pH3.53;流速:0.8 mL/min

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對于親水液相色譜,流動(dòng)相的緩沖鹽、pH值和溫度等對分離起主要作用,在建立方法時(shí)應(yīng)主要考慮,本試驗(yàn)分析過程中采用5 mM乙酸銨-乙腈流動(dòng)相均能獲得較好峰型。當(dāng)分析樣品時(shí),則尿囊素受到大峰干擾,于是通過調(diào)節(jié)乙酸銨的pH來改善分離,結(jié)果當(dāng)pH值至3.53時(shí),獲得良好分離;其它流速等,一般不改善分離度,但比常規(guī)反相色譜更易加快分析速度。另外使用CAD檢測器避免了低波長處雜質(zhì)的干擾


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