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凝膠法中玻片法的創(chuàng)立及改進(jìn)過程

來源:科德角國際生物醫(yī)學(xué)科技(北京)有限公司   2022年10月21日 11:20  

在凝膠法中,由于試管法的使用會消耗大量的鱟試劑,以及在試驗時使用的時間較長、對試驗結(jié)果判定難以標(biāo)準(zhǔn)化的問題。在1974年的時候,有個叫Frauch的科學(xué)家首先創(chuàng)立了玻片法。


那玻片法的使用方法到底是怎么樣的呢?


在Frauch的介紹中說到,首先需要取出10μl的鱟試劑和在試驗前就已經(jīng)處理過的供試品10μl,均滴在無菌無熱原的玻片上,接著將這兩者充分混勻,再在37℃的環(huán)境中靜置30分鐘,最后取出觀察試驗結(jié)果。若發(fā)現(xiàn)被檢樣品中含有內(nèi)毒素,混合物就會形成凝膠,且把載玻片倒置時混合物不會流動并且摸起來很牢固。相反,若被檢樣品不含內(nèi)毒素或者內(nèi)毒素含量較低,混合物就不會形成凝膠,且混合物還會呈流動狀,



到了1977年的時候,Goto等科學(xué)家又對玻片法進(jìn)行了兩點改進(jìn)。


第一點,對鱟試劑以及供試品的使用量均增加到20μl。之所以要增加量,是因為Goto等人發(fā)現(xiàn)Frauch的玻片法在對鱟試劑以及供試品的使用量中僅僅使用10μl,由于量太少的原因,在試驗中就會發(fā)現(xiàn),若是被檢樣品能形成凝膠,但是被檢樣品的體積就會變得更小了,更加難以對試驗結(jié)果進(jìn)行判斷結(jié)果。所以將鱟試劑以及被檢樣品的使用含量增至一倍,這樣的話,試驗結(jié)果的判定就會更加容易,準(zhǔn)確度也會更高。


第二點,就是不再使用含有硅含量的玻片進(jìn)行試驗。因為使用含有硅含量的玻璃制成的玻片,在試驗中將鱟試劑及供試品滴在上面,會使這兩者的液體向四周擴(kuò)散,顯得非常不規(guī)律,在觀察試驗結(jié)果時,就會難以判斷試驗結(jié)果。但是若是使用含有硅含量的玻璃制成的玻片進(jìn)行試驗,滴在上面的鱟試劑以及供試品就會顯得非常穩(wěn)定,不會向四周擴(kuò)散,這樣的話,對試驗結(jié)果的判斷也會更容易些。


總而言之,凝膠法中的玻片法,也是一個檢測細(xì)菌內(nèi)毒素的好方法。


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