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甲基橙經(jīng)常被用作酸滴定的指示劑，因?yàn)樗苊黠@地從pH值為3.1的紅色變?yōu)閜H值為4.4的橙色。因?yàn)轭伾淖兓l(fā)生在大多數(shù)酸的pH值附近，所以甲基橙通常用于強(qiáng)酸滴定而不是堿滴定。
滴定是化學(xué)中的一種技術(shù)，用于查找未知溶液的濃度。滴定中使用了不同的pH指示劑，這些指示劑會在一定的pH值下改變顏色，從而使化學(xué)家可以知道反應(yīng)何時(shí)完成。這些指標(biāo)包括通用指標(biāo)，酚酞和甲基橙。
甲基橙（也用作紡織品染料）由于其明亮而鮮明的顏色變化而被用作滴定的指示劑。在pH值為3.1時(shí)，甲基橙顯示為紅色。當(dāng)pH升高到4.4時(shí)，甲基橙變成亮橙色。酚酞用于堿滴定和某些酸滴定，通用指示劑具有全范圍的顏色變化，而甲基橙則專門用于酸滴定，因?yàn)樗哂蟹浅Ｃ鞔_和尖銳的顏色變化并具有明確的終點(diǎn)。處理甲基橙時(shí)，應(yīng)使用適當(dāng)?shù)陌踩O(shè)備，因?yàn)樗鼤p壞并導(dǎo)致DNA突變。
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