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細(xì)胞培養(yǎng)生長減慢和死亡的原因

來源:蒂科(上海)生物科技有限公司   2022年11月07日 10:11  

培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢這種情況可能的原因包括:

1.由于更換了不同培養(yǎng)液或血清,細(xì)胞需要重新適應(yīng)。

2.試劑保存不當(dāng),培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。

3.培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。

4.接種細(xì)胞起始濃度太低。

5.細(xì)胞已老化。

6.支原體污染。

建議解決方法:

1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實驗。讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。

2換入新鮮配制培養(yǎng)液,或補加谷氨酰胺及生長因子。

3.用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,更換培養(yǎng)物。

4.培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完。

5.增加接種細(xì)胞起始濃度。

6.換用新的保種細(xì)胞。

7.隔離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,更換新的培養(yǎng)物。

培養(yǎng)細(xì)胞死亡的原因:

常見的可能原因是細(xì)胞傳代時,消化過度,細(xì)胞嚴(yán)重受傷。如經(jīng)驗不足,細(xì)胞傳代消化時,在顯微鏡下觀察,至細(xì)胞變圓、脫壁,加入含血清的培養(yǎng)液,終止消化。其他原因包括長途運輸,細(xì)胞在不適宜的溫度下時間過長;培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分消耗殆盡,沒有及時換液。如果原來細(xì)胞狀態(tài)較好,換液后細(xì)胞死亡,應(yīng)考慮是培養(yǎng)液及血清的質(zhì)量。-好事先已證明培養(yǎng)液及血清質(zhì)量良好。

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