国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網>技術中心>操作使用>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

動物組織樣本的前處理

來源:上海佰利萊生物科技有限公司   2022年11月18日 08:59  

一、勻漿介質的制備:

一般采用pH 7.40.01mol/L Tris-HCl1mmol/L EDTA-2Na0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質。

二、組織勻漿的制備

1、取組織塊(0.1g~0.2g)最少可到25mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準確稱重,放入5ml的勻漿管中。

2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化鈉溶液)或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。

3、勻漿的方式有多種:手工勻漿,機器勻漿,超聲粉碎。

① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉動研磨數(shù)十次(6~8分鐘),充分研碎,制成10%的勻漿液。

② 機器勻漿:用組織搗碎機10000~15000 轉/分 上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內切式組織勻漿機制備(勻漿時間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,在冰水中進行),皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。

③ 超聲粉碎:用超聲粉碎機進行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎,也可用國產超聲波發(fā)生儀,用400安培,5秒/次,間隙10秒反復3~5次。

        鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片(直接涂片、染色均可以),顯微鏡下觀察細胞是否破碎,若沒有則可延長勻漿時間。

4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定.

、樣本保存:

        動物組織樣本暫時不測定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如不fan復凍融,-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月。

        制備好的勻漿液建議不要凍存,最好當天進行測定,如放置時間過長相關酶活會有所下降,部分指標4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,總蛋白測定可存5~7天等)


免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
永州市| 东乡县| 竹北市| 鹤山市| 西吉县| 乃东县| 永安市| 周至县| 秦皇岛市| 楚雄市| 泗阳县| 吉木乃县| 当涂县| 新郑市| 兴安县| 玉门市| 嘉义市| 读书| 依安县| 文登市| 陆良县| 澄江县| 封开县| 屏山县| 清水县| 连州市| 利津县| 徐水县| 巴彦县| 拉萨市| 衡南县| 额济纳旗| 玉树县| 白朗县| 北安市| 双柏县| 塘沽区| 句容市| 吉水县| 商南县| 娄烦县|