四甘肽是從天然食品中提取的蛋白質(zhì)，再經(jīng)過(guò)定向酶切及特定小肽分離技術(shù)獲得的小分子多肽物質(zhì)。四甘肽的氨基酸組成中，支鏈氨基酸（亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸）含量很高。具有降血壓、醒酒、護(hù)肝和增強(qiáng)免疫及增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力等作用。本實(shí)驗(yàn)采用Acclaim 120 C18色譜柱，使用磷酸鹽緩沖液對(duì)四苷肽進(jìn)行分析，分離度高，結(jié)果可靠。

分析譜圖見(jiàn)圖2-34。本實(shí)驗(yàn)采用MAbPac SEC-1體積排阻的色譜柱進(jìn)行分析，人血白蛋白的拖尾因子和分離度均達(dá)到藥典要求，按照面積歸一化法計(jì)算，人血白蛋白的多聚體、二聚體及單體的含量與客戶(hù)提供的實(shí)際含量一致。圖2-32 人狂犬病免疫球蛋白1a分析譜圖圖2-33 人狂犬病免疫球蛋白1b分析譜圖圖2-34 樣品含量分析譜圖圖2-31 人免疫球蛋白分析譜圖色譜柱：Acclaim 120 C18，5 µm，4.6×250 mm， P/N：059149流速：1.0mL/min； 柱溫：35℃進(jìn)樣量：10 µL； 檢測(cè)方式：紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)215nm。流動(dòng)相： A：磷酸鹽（11 mmol/L H3PO4 + 800 mmol/L H2O 用三乙胺調(diào)pH 2.5）； B：H3PO4調(diào)節(jié)超純水的pH到2.5； C：乙腈；梯度條件見(jiàn)表2-21：

樣品在乙腈中的溶解度比較低，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)采用DMF和乙腈的混合物溶液溶解樣品，溶解度相對(duì)較大，進(jìn)樣分析Fmoc四甘肽的含量大于98%（采用面積百分比），后改用直接磷酸調(diào)節(jié)pH到2.5，梯度分離Fmoc四甘肽，保留時(shí)間延長(zhǎng)，且柱效更高，對(duì)Fmoc四甘肽的分離較好