人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體（AECA）酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

促腎上腺皮質(zhì)激素受體ACTHR 0.1ml

褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體AGRP 0.2ml

腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體Adrenodoxin 0.2ml

Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體Adracalin 0.2ml

腺相關(guān)病毒5 VP1抗體AAV5 capsid protein VP1 0.1ml

脂肪醛脫氫酶抗體ALDH3A2 0.2ml

抗利尿激素1A抗體AVPR1A 0.2ml

抗利尿激素受體1B抗體AVPR1B 0.2ml

二磷酸腺苷核糖基化因子鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子2抗體ARFGEF2 0.2ml

α增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體ATBF1 0.2ml

脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體ATXN10 0.2ml

蛋白激酶A錨定蛋白7抗體AKAP7 0.2ml

腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體ABCA12 0.2ml

腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體ABCB9 0.2ml

三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體ABCD4 0.2ml

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體ABLIM3 0.2ml

高爾基復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體ACBD3 0.2ml