選擇用于完整蛋白質(zhì)分析的反相色譜柱時(shí)需要考慮多個(gè)相互關(guān)聯(lián)的因素：樣品分子量和最適合的填料孔徑，色譜柱固定相，所用的儀器（特別是檢測(cè)器的類型），流動(dòng)相條件，以及速度或通量要求等。

分析物分子越大，則需要越大的孔徑。除一些例外情況，用于完整蛋白質(zhì)分析的孔徑通常為 300–500 ?。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，孔徑至少應(yīng)為蛋白質(zhì)流體動(dòng)力學(xué)半徑的三倍。AdvanceBio RP-mAb 色譜柱具有 450 ? 的孔徑，ZORBAX RRHD 300 ?、ZORBAX 300SB 和 Poroshell 300 均具有 300 ? 的孔徑，而 PLRP-S 提供多種孔徑。雖然 1000 ? 的 5 µm PLRP-S 色譜柱孔徑明顯大于常用于完整蛋白質(zhì)分析的色譜柱，但是該色譜柱可為完整蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)片段分析提供優(yōu)異的結(jié)果。

對(duì)于反相色譜柱，選擇色譜柱固定相的通用指南是，分子量越大，使用的烷基鏈應(yīng)越短。因此，C18 色譜柱常用于多肽分析，而 C8、C4 和 C3 色譜柱常用于完整蛋白質(zhì)分離。除線性烷基鏈以外，AdvanceBio RP-mAb、ZORBAX RRHD 300 和 ZORBAX 300SB 色譜柱可提供二苯基固定相。有時(shí)，二苯基固定相的不同選擇性可提供所需的分離。PLRP-S 是一種聚合物填料而不是硅膠基填料。它提供典型的反相分離以及略有不同的選擇性和寬 pH 耐受性。

此外，本篇應(yīng)用文集中還包含 AdvanceBio RP mAb、PLRP-S、AdvanceBio HIC、ZORBAX RRHD 300SB 等應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)供您查閱，為生物治療藥物關(guān)鍵質(zhì)量屬性提供新方法，新思路。