艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶):
中性蛋白酶(分散酶)是由多粘芽孢桿菌產(chǎn)生的一種細(xì)菌酶 ,可水解非J性氨基酸殘基的 N 端肽鍵,被歸類為氨基內(nèi)肽酶。其溫和的蛋白水解作用使該酶特別適用于分離初級(jí)和次級(jí)(繼代培養(yǎng))細(xì)胞,因?yàn)樗梢员3旨?xì)胞膜的完整性。
在許多原代細(xì)胞分離和組織解離應(yīng)用中,中性蛋白酶(分散酶)也經(jīng)常與膠原酶和/或其他蛋白酶一起用作輔助酶。中性蛋白酶 (Dispase) 比上皮樣細(xì)胞更有效地解離成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,因此它也被用于差異分離和培養(yǎng)應(yīng)用。其他優(yōu)點(diǎn)是它的非哺乳動(dòng)物(細(xì)菌)來源和被 EDTA 抑制的能力。
組織分離/原代細(xì)胞分離和細(xì)胞收獲是酶在組織中的主要應(yīng)用培養(yǎng)、干細(xì)胞研究和細(xì)胞生物學(xué)研究。細(xì)胞分離程序的目標(biāo)是最/大/化功能上可行的分離細(xì)胞的產(chǎn)量。有許多參數(shù)可能會(huì)影響結(jié)果。酶的選擇是一個(gè)重要參數(shù)。Worthington組織分離指南總結(jié)了這些酶如何完成組織分離和原代培養(yǎng)的“常規(guī)”操作細(xì)胞采集。
艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶)特異性:
中性蛋白酶是一種非特異性金屬蛋白酶。它切割纖連蛋白、膠原蛋白 IV 和較小程度的膠原蛋白 I,但它不切割膠原蛋白 V 或?qū)诱尺B蛋白。它水解非J性氨基酸殘基的 N 端肽鍵,并可能優(yōu)先攻擊具有暴露疏水性氨基酸殘基的變性和細(xì)胞間蛋白質(zhì)。據(jù)信每個(gè)亞基結(jié)合一個(gè)鋅離子和四個(gè)鈣離子。與其他產(chǎn)生中性、堿性或兩種蛋白酶混合物的芽孢桿菌不同,多粘類芽孢桿菌是僅產(chǎn)生中性蛋白酶的三個(gè)種類之一(Fogarty 和 Griffin 1973)。
艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶)應(yīng)用:
組織分解和繼代培養(yǎng)
防止不需要的細(xì)胞聚集
培養(yǎng)細(xì)胞的制備
將完整的表皮從真皮中分離出來,并從培養(yǎng)基中分離出完整的上皮層 (Kurt et al. 1989)
正常、二倍體細(xì)胞和細(xì)胞系的收獲和轉(zhuǎn)移 (Matsumura et. al 1975)
溫和且完整的表皮細(xì)胞脫離(Kitano 和 Okada 1983)
Worthington核心酶:包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。
Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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