艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶):
中性蛋白酶(分散酶)是由多粘芽孢桿菌產生的一種細菌酶 ,可水解非J性氨基酸殘基的 N 端肽鍵,被歸類為氨基內肽酶。其溫和的蛋白水解作用使該酶特別適用于分離初級和次級(繼代培養(yǎng))細胞,因為它可以保持細胞膜的完整性。
在許多原代細胞分離和組織解離應用中,中性蛋白酶(分散酶)也經常與膠原酶和/或其他蛋白酶一起用作輔助酶。中性蛋白酶 (Dispase) 比上皮樣細胞更有效地解離成纖維細胞樣細胞,因此它也被用于差異分離和培養(yǎng)應用。其他優(yōu)點是它的非哺乳動物(細菌)來源和被 EDTA 抑制的能力。
組織分離/原代細胞分離和細胞收獲是酶在組織中的主要應用培養(yǎng)、干細胞研究和細胞生物學研究。細胞分離程序的目標是最/大/化功能上可行的分離細胞的產量。有許多參數(shù)可能會影響結果。酶的選擇是一個重要參數(shù)。Worthington組織分離指南總結了這些酶如何完成組織分離和原代培養(yǎng)的“常規(guī)”操作細胞采集。
艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶)特異性:
中性蛋白酶是一種非特異性金屬蛋白酶。它切割纖連蛋白、膠原蛋白 IV 和較小程度的膠原蛋白 I,但它不切割膠原蛋白 V 或層粘連蛋白。它水解非J性氨基酸殘基的 N 端肽鍵,并可能優(yōu)先攻擊具有暴露疏水性氨基酸殘基的變性和細胞間蛋白質。據(jù)信每個亞基結合一個鋅離子和四個鈣離子。與其他產生中性、堿性或兩種蛋白酶混合物的芽孢桿菌不同,多粘類芽孢桿菌是僅產生中性蛋白酶的三個種類之一(Fogarty 和 Griffin 1973)。
艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶)應用:
組織分解和繼代培養(yǎng)
防止不需要的細胞聚集
培養(yǎng)細胞的制備
將完整的表皮從真皮中分離出來,并從培養(yǎng)基中分離出完整的上皮層 (Kurt et al. 1989)
正常、二倍體細胞和細胞系的收獲和轉移 (Matsumura et. al 1975)
溫和且完整的表皮細胞脫離(Kitano 和 Okada 1983)
Worthington核心酶:包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。
Worthington主要研究覆蓋生物技術和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質量純化酶,蛋白質,核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質的產品與服務。
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