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冰凍切片組織TUNEL測定試劑盒產品說明書

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2022年11月29日 10:08  

主要用途

 

冰凍切片組織TUNEL測定試劑是一種旨在使用標準化的化學方法,包括固著、封阻、通透等完整步驟,從存檔中的冰凍組織切片中探尋DNA斷點,即運用修飾過的核苷酸,在末端脫氧核糖核酸轉移酶TdT的幫助下,DNA單鏈或雙鏈上斷點處的3’末端進行標記,原位探測和定量分析單細胞水平的DNA降解狀況的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。主要適用于冰凍組織切片的DNA降解測定。廣泛用于細胞凋亡的研究。產品嚴格無菌,即到即用,反應敏感,操作簡捷,性能穩(wěn)定。

用戶自備

 

小型染色缸:用于切片的清洗操作

光學顯微鏡:用于細胞染色后觀察分析

甲基綠復染試劑盒(GMS40010):用于細胞染色后的復染

實驗步驟

 

一、樣品預處理

 

1. 取出10片待測的冰凍組織切片

2. 室溫下,小心加上200微升清理液(Reagent A在切片上,鋪滿樣品表面

3. 小心移去切片上的清理液(Reagent A

4. 小心加上100微升固著液(Reagent B,鋪滿整個樣品表面

5. 室溫下孵育30分鐘

6. 小心移去切片上的固著液(Reagent B

7. 室溫下,將切片置入50毫升清理液(Reagent A中,孵育2分鐘

8. 小心移去切片上的清理液(Reagent A

9. 小心加上50微升封阻液(Reagent C,鋪滿整個樣品表面

10. 室溫下孵育30分鐘

11. 室溫下,將切片置入50毫升清理液(Reagent A中,孵育5分鐘

12. 小心移去切片上的清理液(Reagent A

 

二、斷點標記處理

 

1. 小心加上50微升酶標液(Reagent D,鋪滿整個切片樣品表面

2. 37℃濕潤的培養(yǎng)箱里,孵育1小時,保持濕潤,避免干燥

3. 小心移去切片上的酶標液(Reagent D

4. 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent A中孵育2分鐘

5. 小心移去切片上的清理液(Reagent A

注意事項

 

1. 本產品為10次操作

2. 操作時,須戴手套

3. 封阻液(Reagent C達到100%封閉效果,超過雙氧水封閉效果

4. 本產品為生物素標記,超過熒光素標記強度1000

5. 本產品無需POD轉換,直接在光學顯微鏡下觀察,既方便,又確保信號不受影響

6. 酶標液(Reagent D嚴禁反復凍融

7. 清理液(Reagent A50毫升置于小型染色缸里,可重復使用

8. 所有操作在室溫下進行,除操作中規(guī)定之外

9. 每次更換試劑溶液時,保持樣品表面基本晾干:可以使用餐巾綿紙吸干或槍頭抽掉

10. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面

11. 染色完成后,即刻進行光學顯微鏡觀察

12. 本公司提供系列細胞凋亡試劑產品

 

質量標準

 

1. 本產品經鑒定性能穩(wěn)定

2. 本產品經鑒定顯色清晰


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