在我們平時(shí)的實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常要用到PB和PBS,那么,你真的了解什么是PBS嗎?
PB 是“phosphate buffer”的縮寫,一般稱為“磷酸緩沖溶液”,依靠磷酸緩沖對(duì)(H2PO4-和HPO42-)起到維持溶液pH值的作用,陽離子則一般是Na+或K+。
PBS 是“phosphate buffer saline”的縮寫,中文通常稱其為“磷酸緩沖鹽溶液”,但更準(zhǔn)確地譯名應(yīng)該是“磷酸緩沖生理鹽水”,是生物實(shí)驗(yàn)廣泛使用的一種緩沖溶液。通常是在PB的基礎(chǔ)上加入NaCl,擁有和人體體液類似的滲透壓和pH值。為了滿足其它需求,有時(shí)也加入K+,Ca2+或Mg2+。
1.緩沖pH范圍
磷酸緩沖液的緩沖pH值范圍非常廣泛,可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液。
酸性緩沖液:可直接用NaH2PO4或KH2PO4,pH范圍在1-5;
堿性緩沖液:可直接用Na2HPO4或K2HPO4,pH范圍在9-12;
中性緩沖液:用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液按照不同比例進(jìn)行混合,pH在5.5-8.5。
2.濃度計(jì)算
通常所說的磷酸緩沖液的濃度,比如0.1M、0.01M,是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度,包括解離的和未解離的,而不是Na+或者K+的濃度。
正是因?yàn)槿绱?,在配制中性緩沖液時(shí),用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,并不影響磷酸根離子的濃度。
3.磷酸緩沖液優(yōu)缺點(diǎn)
優(yōu)點(diǎn):
易配制各種濃度的緩沖液;
適用的pH值范圍寬,可配置各種pH值的緩沖液;
pH受溫度影響較??;
緩沖能力強(qiáng),緩沖液被稀釋后pH變化小。
缺點(diǎn):
易與常見的鈣離子Ca2+、Mg2+及一些重金屬離子締合形成沉淀;
會(huì)抑制某些生化反應(yīng)過程,如抑制某些酶的催化過程等。
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