96孔培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細(xì)胞的一種常用和重要的工具,依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型),在他們看來(lái),我們需要重點(diǎn)考慮孔的數(shù)量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。
1.孔的數(shù)量
大多數(shù)用戶(hù)在組織培養(yǎng)瓶上開(kāi)始組織培養(yǎng)。不過(guò),許多應(yīng)用也需要多孔板。理想的數(shù)量嘛,取決于你所需的通量水平,以及是否有機(jī)器人的協(xié)助。手動(dòng)地向96孔板中添加試劑,這并非不可行,但有電動(dòng)移液器或機(jī)器人的幫助當(dāng)然更好。擴(kuò)展到384孔板,就更加需要機(jī)器人,而1536孔板更是需要。當(dāng)然,高密度多孔板的挑戰(zhàn)還在于分析小型化。
2.孔的形狀
孔的底部可以選擇平的、圓的,或錐形的,這取決于細(xì)胞類(lèi)型和下游應(yīng)用。對(duì)于傳統(tǒng)的2D細(xì)胞培養(yǎng),特別是需要對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行成像或分光光度測(cè)定,通常選平底。對(duì)于不存在接觸抑制的細(xì)胞,弧形底也不錯(cuò)。圓底適合懸浮培養(yǎng),因?yàn)閳A的表面讓細(xì)胞難以附著和生長(zhǎng)。而錐形底很少用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),但在細(xì)胞沉淀時(shí)可能有用。
3.微孔板的顏色
多孔板的顏色也與應(yīng)用息息相關(guān)。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細(xì)胞,可選擇透明的多孔板。不過(guò),對(duì)于可見(jiàn)光光譜以外的應(yīng)用,有顏色的多孔板則是必需的。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時(shí),底部應(yīng)該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時(shí),應(yīng)選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便最大限度提高信號(hào)的反射率,而大于300nm的熒光應(yīng)用通常使用黑色表面,以吸收激發(fā)信號(hào)。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號(hào)串?dāng)_。
4.表面處理
選擇哪種細(xì)胞表面處理,這要取決于你培養(yǎng)的是懸浮細(xì)胞還是貼壁細(xì)胞。
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