自實體組織分離是動物細胞的主要來源，目前生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛的細胞株如CHO細胞、293細胞、Vero細胞等最初均分離自不同動物的組織器官。那如何最/有/效分離出想要的單細胞呢？無論是原代細胞獲取還是成熟細胞株的消化傳代，細胞消化都是關(guān)鍵的一環(huán)，今天逐典給大家整理一篇細胞消化大全，方便您更好的選擇適合自己實驗的產(chǎn)品。

細胞消化在不同領(lǐng)域的應(yīng)用

1. 原代細胞

直接從生物體獲取的組織更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)，且生物性狀尚未發(fā)生很大改變，因此在藥物篩選、細胞移植、類器官培養(yǎng)、腫瘤研究等眾多領(lǐng)域備受歡迎。針對不同組織采用不同的消化酶能使解離過程更加高效，酶解法也是主要的細胞解離方式，主要以胰蛋白酶為主，輔助添加其他蛋白酶增強活力。

2.細胞傳代

以單層生長的細胞彼此之間以及與培養(yǎng)皿發(fā)生蛋白質(zhì)接觸，一般細胞長至80%-90%密度需要傳代消化，貼壁細胞傳代前，需要把細胞用消化試劑從培養(yǎng)容器表面解離出來，細胞得以分離成單個懸液傳代至含新鮮培養(yǎng)基的新容器內(nèi)。消化方法以酶解法為主，胰蛋白酶是最/常/用的解離試劑。

通常的細胞消化策略：

小規(guī)模的細胞收集可使用吹打或細胞刮刀

形成蛋白緊密連接的，可采用胰蛋白酶

上皮細胞等可表達鈣粘蛋白的細胞，在酶消化基礎(chǔ)上需添加EDTA等螯合劑

為了保持細胞活力，消化反應(yīng)條件應(yīng)與細胞接觸的強度相匹配。

如果將反應(yīng)強度與細胞系的粘附特性相匹配，但細胞仍難以去除，則在生長培養(yǎng)基中可能存在抑制胰蛋白酶的元素，例如血清，可以通過在添加解離試劑之前用PBS簡單地沖洗細胞一次或兩次來克服。此外，形成特別強的多層細胞融合也是需要注意的。

毫無疑問，胰蛋白酶作為原代細胞獲取、細胞傳代消化中必/不/可/少的原料之一，在生物制藥工藝中也是重要的生產(chǎn)原輔料。應(yīng)用于生物制藥工藝意味著更高的質(zhì)量標準，動物來源、藥典要求、生產(chǎn)級別、批間穩(wěn)定性等都是胰蛋白酶產(chǎn)品的重要指標！

逐典Trypelectase重組胰蛋白酶和Tryplus消化液作為專注細胞消化領(lǐng)域的胰酶產(chǎn)品，專門為工藝和生產(chǎn)設(shè)計。

Trypelectase非動物源重組胰蛋白酶干粉產(chǎn)品，方便生產(chǎn)大規(guī)模配置，存儲、轉(zhuǎn)運更方便。還有高穩(wěn)定性且即開即用的TrypLUS消化液，高封閉性滿足細胞消化領(lǐng)域的不同規(guī)模需求。

Trypelectase重組胰蛋白酶特點

符合藥典中重組胰蛋白酶的相關(guān)標準

生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求，生產(chǎn)過程完/全符合GMP指導(dǎo)原則

重組生產(chǎn)，生產(chǎn)過程部使用任何動物來源原料，無外源性病毒污染，使用安全

批量生產(chǎn)，可以保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn)，產(chǎn)品批次間無差異，質(zhì)量穩(wěn)定

純度高，不含雜酶，宿主蛋白和宿主細胞DNA殘留量符合藥典標準

TrypLUS消化液特點

純度高，酶切特異性好，減少多種酶裂解造成的細胞損傷

2-8℃可穩(wěn)定保存24個月，室溫也可穩(wěn)定放置，節(jié)省冰箱存儲空間

直接替代胰蛋白酶消化流程，培養(yǎng)基稀釋即可，無需酶活抑制劑

沒有動物來源成分，極大程度上減少外來污染

應(yīng)用范圍廣，適合有血清或無血清環(huán)境的細胞消化